Generation of Ca2+-independent sortase A mutants with enhanced activity for protein and cell surface labeling.
Generation of Ca2+-independent sortase A mutants with enhanced activity for protein and cell surface labeling.
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DOI：
10.1371/journal.pone.0189068
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发表时间：
2017
期刊：
影响因子：
3.7
通讯作者：
Dougan SK
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Jeong HJ;Abhiraman GC;Story CM;Ingram JR;Dougan SK
山梨酸酶A是一种来源于金黄色葡萄球菌的钙依赖转肽酶，广泛应用于荧光染料和其他部分与蛋白质或真核细胞表面的偶联。在体内和基于细胞的应用中，由于钙浓度范围很大，以及生命系统中蛋白质-蛋白质相互作用的瞬变性质，分类酶的应用受到了一定的限制。为了将分类酶A用于细胞标记应用，我们通过组合多个突变来产生一种新的分类酶A变体，以产生一种既不依赖钙又具有高活性的酶。该变异体增强了N-末端和C-末端标记的活性，以及在生理条件下对细胞表面的修饰。
Sortase A, a calcium-dependent transpeptidase derived from Staphylococcus aureus, is used in a broad range of applications, such as the conjugation of fluorescent dyes and other moieties to proteins or to the surface of eukaryotic cells. In vivo and cell-based applications of sortase have been somewhat limited by the large range of calcium concentrations, as well as by the often transient nature of protein-protein interactions in living systems. In order to use sortase A for cell labeling applications, we generated a new sortase A variant by combining multiple mutations to yield an enzyme that was both calcium-independent and highly active. This variant has enhanced activity for both N- and C-terminal labeling, as well as for cell surface modification under physiological conditions.
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影响因子：
18.2
作者：
Rashidian M;Keliher E;Dougan M;Juras PK;Cavallari M;Wojtkiewicz GR;Jacobsen J;Edens JG;Tas JM;Victora G;Weissleder R;Ploegh H
通讯作者：
Ploegh H
DOI：
10.1083/jcb.201112098
发表时间：
2012-03-19
期刊：
The Journal of cell biology
影响因子：
--
作者：
Roux KJ;Kim DI;Raida M;Burke B
通讯作者：
Burke B
影响因子：
14.8
作者：
Witte MD;Wu T;Guimaraes CP;Theile CS;Blom AE;Ingram JR;Li Z;Kundrat L;Goldberg SD;Ploegh HL
通讯作者：
Ploegh HL
影响因子：
4.8
作者：
Ton-That, H;Mazmanian, SK;Schneewind, O
通讯作者：
Schneewind, O
影响因子：
4
作者：
Swee, Lee Kim;Lourido, Sebastian;Bell, George W.;Ingram, Jessica R.;Ploegh, Hidde L.
通讯作者：
Ploegh, Hidde L.