A Rapid Assay for SARS-CoV-2 Neutralizing Antibodies That Is Insensitive to Antiretroviral Drugs.
A Rapid Assay for SARS-CoV-2 Neutralizing Antibodies That Is Insensitive to Antiretroviral Drugs.
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DOI：
10.4049/jimmunol.2100155
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发表时间：
2021-07-01
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Nemazee D
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Huang D;Tran JT;Peng L;Yang L;Suhandynata RT;Hoffman MA;Zhao F;Song G;He WT;Limbo O;Callaghan S;Landais E;Andrabi R;Sok D;Jardine JG;Burton DR;Voss JE;Fitzgerald RL;Nemazee D
SARS-CoV-2刺突假型病毒（PSV）检测被广泛用于测量血清和分离的中和抗体（nAb）的中和滴度。PSV中和试验比活病毒中和试验更安全，不需要进入BSL-3实验室。然而，许多PSV测定仍然具有一定的挑战性，并且需要至少两天来进行。在这里，我们报告了一种快速（<30分钟），灵敏，无细胞，现成和准确的测定受体结合结构域（RBD）的nAb检测。我们的基于邻近的荧光素酶测定利用了最有效的SARS-CoV-2 nAb通过阻断SARS-CoV-2和ACE 2之间的结合而发挥作用的事实。使用来自加标免疫动物和COVID-19患者的分离nAb和血清对该方法进行了验证。该方法特别适用于接受抗逆转录病毒治疗的HIV患者，这些治疗会干扰传统的PSV检测。该方法提供了一种具有成本效益的即时替代方法，用于评估由感染或疫苗引起的主要SARS-CoV-2中和抗体的效力和广度。
SARS-CoV-2 spike pseudotyped virus (PSV) assays are widely used to measure neutralization titers of sera and of isolated neutralizing antibodies (nAbs). PSV neutralization assays are safer than live virus neutralization assays and do not require access to BSL-3 laboratories. However, many PSV assays are nevertheless somewhat challenging and require at least two days to carry out. Here, we report a rapid (<30 min), sensitive, cell-free, off-the-shelf and accurate assay for receptor binding domain (RBD) nAb detection. Our proximity-based luciferase assay takes advantage of the fact that the most potent SARS-CoV-2 nAbs function by blocking the binding between SARS-CoV-2 and ACE2. The method was validated using isolated nAbs and sera from spike-immunized animals and COVID-19 patients. The method was particularly useful in HIV patients taking antiretroviral therapies that interfere with the conventional PSV assay. The method provides a cost-effective and point-of-care alternative to evaluate the potency and breadth of the predominant SARS-CoV-2 neutralizing antibodies elicited by infection or vaccines.
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