Genetic engineering of untransformable coagulase-negative staphylococcal pathogens
Genetic engineering of untransformable coagulase-negative staphylococcal pathogens
复制标题
不可转化凝固酶阴性葡萄球菌病原体的基因工程
DOI：
10.1038/nprot.2016.058
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发表时间：
2016
期刊：
影响因子：
14.8
通讯作者：
Peschel A
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Winstel V;Kühner P;Rohde H;Peschel A
凝固酶阴性葡萄球菌（con）被认为是重要的条件致病菌。然而，目前对毒性机制的了解非常有限，因为相当大比例的con对现有的DNA转化技术是难用的。我们描述了一种使用噬菌体Φ187进行质粒转移的有效方案，它可以将质粒DNA从一种独特的工程金黄色葡萄球菌菌株中转导到广泛的con。使用限制缺陷，修饰精通的金黄色葡萄球菌PS187突变体，具有con -型噬菌体表面受体，即使在con难以电穿孔的情况下，也可以将质粒转移到con上。一旦Φ187滴度达到每毫升10 - 9个斑块形成单位，质粒转移可以在1-2天内完成。因此，我们的方案是一项重大的技术进步，为研究con介导的感染提供了有吸引力的机会。
Coagulase-negative staphylococci (CoNS) are recognized as significant opportunistic pathogens. However, current knowledge of virulence mechanisms is very limited because a significant proportion of CoNS are refractory to available techniques for DNA transformation. We describe an efficient protocol for plasmid transfer using bacteriophage Φ187, which can transduce plasmid DNA to a wide range of CoNS from a unique, engineered Staphylococcus aureus strain. The use of a restriction-deficient, modification-proficient S. aureus PS187 mutant, which has a CoNS-type bacteriophage surface receptor, allows plasmid transfer to CoNS even when they are refractory to electroporation. Once the Φ187 titer reaches 10 9 plaque-forming units per milliliter, plasmid transfer can be accomplished within 1–2 d. Thus, our protocol is a major technical advance offering attractive opportunities for research on CoNS-mediated infections.
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影响因子：
16.6
作者：
Winstel, Volker;Liang, Chunguang;Sanchez-Carballo, Patricia;Steglich, Matthias;Munar, Marta;Broeker, Barbara M.;Penades, Jose R.;Nuebel, Ulrich;Holst, Otto;Dandekar, Thomas;Peschel, Andreas;Xia, Guoqing
通讯作者：
Xia, Guoqing
使用独特的噬菌体将质粒 DNA 转移至临床凝固酶阴性葡萄球菌病原体
影响因子：
4.4
作者：
Winstel V;Kühner P;Krismer B;Peschel A;Rohde H
通讯作者：
Rohde H
影响因子：
6.7
作者：
Geiger T;Francois P;Liebeke M;Fraunholz M;Goerke C;Krismer B;Schrenzel J;Lalk M;Wolz C
通讯作者：
Wolz C
影响因子：
2.6
作者：
Bae, T;Schneewind, O
通讯作者：
Schneewind, O
葡萄球菌中原生质体融合的质粒转移和基因重组
影响因子：
3.2
作者：
F. Götz;S. Ahrné;M. Lindberg
通讯作者：
M. Lindberg