酰基甘油激酶通过影响PTEN/PI3K/Akt/Gsk3β 信号通路调控血小板活化
酰基甘油激酶通过影响PTEN/PI3K/Akt/Gsk3β 信号通路调控血小板活化
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DOI：
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发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
张俊峰
中科院分区：
文献类型：
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作者：
张鹏;毕昌龙;魏萌;姜哲轶;张田田;张俊峰
目的:探究酰基甘油激酶(AGK)在血小板活化中的作用及可能的调控机制。 方法:分别提取野生型小鼠(WT)和 AgkG126E 点突变(AGK 激酶活性丧失)小鼠(PM) 的血小板。将等体积、等浓度的 WT 或 PM 小鼠的血小板放入聚集仪，分别利用 3 种刺激 剂(α-Thrombin、ADP、U46619)刺激，检测每种刺激剂作用下相应的血小板聚集水平;每 管聚集曲线达到最大稳定值后，加入等体积的 ATP 荧光检测剂，检测相应血小板活化过程中 释放的 ATP 水平。分别在静息态 WT 或 PM 小鼠血小板(不加 α-Thrombin 刺激)、活化态 WT 或 PM 小鼠血小板(加入 α-Thrombin 刺激)中加入等量荧光偶联的纤维蛋白原(Fg)， 利用流式细胞仪检测血小板的 Fg 结合水平。Western blot 法分别检测静息态(不加刺激剂) 和活化态(加入 α-Thrombin、ADP、U46619 刺激)WT 或 PM 小鼠血小板中关键信号通路 蛋白的磷酸化水平。结果:在刺激剂作用于血小板后，PM 小鼠血小板的聚集程度、ATP 释 放水平及 Fg 结合能力均明显低于 WT 小鼠的血小板(P 均<0.01)。与 WT 小鼠相比，PM 小鼠的血小板在活化过程中张力蛋白同源性磷酸酶(PTEN)、磷脂酰肌醇 3- 激酶(PI3K)、 蛋白激酶 B(Akt-Thr308)和糖原合成激酶 3β(Gsk3β-Ser9)的磷酸化水平均明显降低(P 均<0.01)。 结论:酰基甘油激酶可能通过影响 PTEN/PI3K/Akt/Gsk3β 信号通路，参与调控血小板的活化。