长链非编码RNA BRE-AS1在非小细胞肺癌中的表达及其调控功能
长链非编码RNA BRE-AS1在非小细胞肺癌中的表达及其调控功能
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DOI：
10.13213/j.cnki.jeom.2021.21024
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发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
梁戈玉
中科院分区：
文献类型：
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作者：
王娴;张艳秋;申娴;尹立红;浦跃朴;梁戈玉
[背景]非小细胞肺癌(NSCLC)是严重危害人类健康的恶性肿瘤,长链非编码RNA(lncRNA)可能在其发生发展中发挥重要作用。 [目的]探讨lncRNA BRE-AS1在NSCLC中的表达、生物学功能和调控作用,为进一步了解NSCLC发病机制提供理论依据。 [方法]利用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术对91例来自南京胸科医院的原发性NSCLC患者的癌组织和癌旁组织以及NSCLC细胞中BRE-AS1表达水平进行检测,应用TCGA RNASeqV2系统分析TCGA数据库中BRE-AS1在1 016例NSCLC组织和110例正常组织中的表达水平。应用受试者工作特征(ROC)曲线评价BRE-AS1对NSCLC的诊断价值,应用t检验分析不同临床特征NSCLC患者的BRE-AS1表达水平。采用慢病毒转染在NSCLC细胞A549中构建BRE-AS1过表达稳转细胞株,分别以CCK8法和流式细胞术检测BRE-AS1对细胞增殖、周期及凋亡的影响。通过功能富集分析BRE-AS1的下游信号通路并用Western blotting法检测信号通路中关键蛋白表达水平。 [结果] RT-qPCR和TCGA数据库分析结果显示BRE-AS1在NSCLC组织[RT-qPCR:差异表达倍数(FC)=-13.15,TCGA:FC=-4.85,P < 0.05]和NSCLC细胞A549(FC=-4.87,P < 0.05)中表达下调。ROC分析结果显示BRE-AS1对NSCLC具有较强的诊断能力(NSCLC组织:曲线下面积为0.916,95 %CI:0.872~0.960;TCGA数据库:曲线下面积为0.853,95 %CI:0.809~0.897)。 CCK8结果显示,在A549细胞中过表达BRE-AS1后,细胞增殖能力在24、36、48 h降低(P < 0.01);同时流式细胞术分析显示,过表达BRE-AS1阻滞A549细胞周期于G2/M期,并诱导细胞凋亡率上升(P < 0.05)。功能富集分析发现,磷酸肌醇3-激酶(PI3K)-蛋白激酶B(AKT)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路与NSCLC发生发展相关(P < 0.05),进一步Western blotting法分析发现,过表达BRE-AS1后,A549细胞中AKT3、p-AKT3、mTOR、p-mTOR表达以及p-AKT3/AKT3、p-mTOR/mTOR均下降,PTEN表达上升,提示过表达BRE-AS1可抑制A549细胞中PI3K-AKT-mTOR信号通路。 [结论] BRE-AS1在NSCLC中表达下调,具有较高诊断价值。BRE-AS1可能通过抑制PI3KAKT- mTOR信号传导途径降低A549细胞生长活力,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,进而影响NSCLC发生发展。