Designed Streptococcus pyogenes Sortase A Accepts Branched Amines as Nucleophiles in Sortagging.
Designed Streptococcus pyogenes Sortase A Accepts Branched Amines as Nucleophiles in Sortagging.
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设计的化脓性链球菌分选酶 A 在分选中接受支链胺作为亲核试剂。
DOI：
10.1021/acs.bioconjchem.0c00486
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发表时间：
2020
影响因子：
4.7
通讯作者：
U. Schwaneberg
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Zhi Zou;Maximilian Nöth;Felix Jakob;U. Schwaneberg
sortase介导的结扎（sortagging）通常使用严格识别n端甘氨酸残基的金黄色葡萄球菌sortase A （SaSrtA）进行。为了提高化脓性链球菌对不同n端氨基酸残基的转肽酶活性，设计了合理的化脓性链球菌分选酶a （SpSrtA）。生成的变体SpSrtA M3 （E189H/V206I/E215A）的催化效率提高了6.6倍（与SpSrtA野生型相比）。此外，M3与野生型亲本一样，对n端丙氨酸、甘氨酸、丝氨酸残基以及支链（α-碳）伯胺具有特异性。此外，M3应用于蛋白质的从头到尾的主链环化。
Sortase-mediated ligation (sortagging) is commonly performed using the Staphylococcus aureus sortase A (SaSrtA) that strictly recognizes the N-terminal glycine residue. In this work, a rational design of Streptococcus pyogenes sortase A (SpSrtA) for improved transpeptidase activity toward different N-terminal amino acid residues was conducted. The generated variant SpSrtA M3 (E189H/V206I/E215A) showed up to 6.6-fold (vs SpSrtA wild-type) enhanced catalytic efficiency. Additionally, M3 retains the specificity toward N-terminal alanine, glycine, serine residues, as well as branched (at α-carbon) primary amines as wild-type parent. Furthermore, M3 was applied for head-to-tail backbone cyclization of proteins.
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DOI：
10.1039/c1cc13322e
发表时间：
2011-08-28
期刊：
Chemical communications (Cambridge, England)
影响因子：
--
作者：
Wu Z;Guo X;Guo Z
通讯作者：
Guo Z
影响因子：
15
作者：
Buldun, Can M.;Jean, Jisoo X.;Howarth, Mark
通讯作者：
Howarth, Mark
影响因子：
3.5
作者：
Schmohl, Lena;Bierlmeier, Jan;Schwarzer, Dirk
通讯作者：
Schwarzer, Dirk
影响因子：
2.9
作者：
Frankel, BA;Kruger, RG;McCafferty, DG
通讯作者：
McCafferty, DG
影响因子：
11.4
作者：
Vemula, Venukumar;Ni, Zhixu;Fedorova, Maria
通讯作者：
Fedorova, Maria