9-芴甲基氯甲酸酯柱前衍生反相高效液相色谱法测定大鼠脑内海马组织中谷氨酸与γ-氨基丁酸含量
9-芴甲基氯甲酸酯柱前衍生反相高效液相色谱法测定大鼠脑内海马组织中谷氨酸与γ-氨基丁酸含量
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DOI：
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发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
吴原
中科院分区：
文献类型：
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作者：
曾春梅;雷丹青;董乐;廖宇晗;黄琪;吴原
目的：建立并改良柱前衍生反相高效液相色谱法(RP—HPLC)，测定大鼠脑内海马组织中氨基酸类神经递质，研究戊四唑(PTZ)致痫大鼠脑内海马组织中谷氨酸(GLu)及r氨基丁酸(GABA)的含量变化。方法：通过PTZ皮下注射SD大鼠进行癫痫动物造模，将大鼠随机分为正常对照组(皮下注射生理盐水)、癫痫组(皮下注射PTZ)，样品经甲醇及乙腈处理后，采用RedClassicalAQ-C18色谱柱(5肚m，250 mm*4．6 mm)，以9一芴甲基氯甲酸酯(FMOC—CL)为柱前衍生剂，流动相A：50 mmol／L乙酸钠溶液(PH4．8)410 mL+去离子水85 mL+四氢呋喃5 mL；流动相B：乙腈500 mL。流速：1．0 mL／min，在柱温30～32℃下采用梯度洗脱程序进行洗脱，检测波长265 nm。结果：GLu和GABA在30 min内分离完全，在质量浓度为20～200 gg／mL范围内有良好的线性关系，线性相关系数均大于0．9995；两种氨基酸加标回收率均大于100％，加标回收率的RSD均小于2％。结论：改良后的FMOC—CL柱前衍生反相高效液相色谱法稳定、简单、反应快速、灵敏度高、特异性及重复性好，能有效分离并检测大鼠脑内海马组织中的GLu与GABA。