过表达水牛睾丸FGF2基因维持水牛精原细胞的体外培养
过表达水牛睾丸FGF2基因维持水牛精原细胞的体外培养
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DOI：
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发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
卢克焕
中科院分区：
文献类型：
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作者：
李婷婷;罗奥林;耿双双;赵鹏伟;杨欢;许惠艳;陆阳清;梁兴伟;杨小淦;卢克焕
水牛睾丸支持细胞(Sertoli cells)是环绕在精原干细胞(spermatogonial stem cells, SSCs)周围的一类体细胞,为SSCs增殖提供物理支持及稳定的环境,同时参与血睾屏障形成。支持细胞可分泌FGF2,从而提高SSCs存活和增殖。至今为止,水牛SSCs培养体系仍然面临许多挑战,推测内源性的FGF2可提高SSCs在体外培养时的自我更新和增殖能力。为此,本研究探索了水牛支持细胞的分离纯化方法,对比了幼年和成年水牛支持细胞FGF2的表达差异,并构建了支持细胞FGF2过表达细胞系。结果表明,幼年水牛支持细胞作为饲养层更有利于维持SSCs的增殖。实时荧光定量PCR显示FGF2在过表达细胞系中的水平显著高于幼年水牛支持细胞对照组的水平。与幼年水牛支持细胞作为饲养层共培养的SSCs相比,FGF2过表达支持细胞系作为饲养层共培养SSCs显著提高PLZF (P<0.05)、OCT4 (P<0.05)和GFRα1 (P<0.05)的表达水平,并且明显改善了SSCs的体外培养性能。本研究为优化水牛SSCs体外培养系统提供理论和实践基础。