Preparation of highly specific polyclonal antibody for human zinc transporter ZIP8.
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DOI：
10.1093/abbs/gmv099
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发表时间：
2015-11
影响因子：
3.7
通讯作者：
Zhong-Sheng Zang;Yan-Ming Xu;Andy T. Y. Lau
中科院分区：
文献类型：
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作者：
Zhong-Sheng Zang;Yan-Ming Xu;Andy T. Y. Lau
进细胞质[2 ] 。ZIP8 被屏蔽被 BCG-CWS (杆菌 Calmette-Guerin 房间墙骨骼) 高度导致的 cDNA 原来在主要单核白血球识别[3 ] 。自从它的第一发现， ZIP8 被发现了仔细在象 T 房间激活和天生的免疫那样的免疫系统被含有。ZIP8 也是描绘得好的镉(Cd ) transporter，在 vitro 并且在 vivo 实验由两个示威了[4,5 ] 。象另外的压缩一样[6,7 ] ， dimerization 和 glycosylation 的各种各样的度在 ZIP8 上被观察了[2 ] 。因此，在不同条件下面内长的 ZIP8 变化检测表示，高度特定的 anti-ZIP8 抗体被需要。在这研究，我们开发了新策略用作为 immunogen 包含人的 ZIP8 蛋白质和 GST 的 N 终端区域的肽产生 polyclonal anti-ZIP8 抗体。在我们的实验室产生的产生抗血清为由 ELISA 示威了的 ZIP8 察觉高度有效、特定，西方的弄污，并且染色的 immunofluorescent。生产 anti-ZIP8 抗体， ZIP8 N 终端区域的开始的 100 氨基酸，包含了更多的 B 房间 epitopes 并且与另外的压缩显示出更少的相同，为抗体生产被选择为 immunogen 的部分(图 ? 1 ) 。GST-hZIP8 (100aa ) 熔化蛋白质在包括身体被表示，有 sarkosyl 和 refolded 的 solubilized 面对三重氢核 X-100 和小伙子(增补微量。S1 和 S2A ) 。为从包括身体净化 GST 熔化蛋白质的这个方法被道等描述。[8 ] 。它值得提及那正在增加 GSH elution 的 pH