Inactivation and Self-association of Ca/Calmodulin-dependent Protein Kinase II during Autophosphorylation (*)
Inactivation and Self-association of Ca/Calmodulin-dependent Protein Kinase II during Autophosphorylation (*)
复制标题
自磷酸化过程中 Ca/钙调蛋白依赖性蛋白激酶 II 的失活和自缔合 (*)
DOI：
--
复制
发表时间：
1996
影响因子：
4.8
通讯作者：
Neal Waxham
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
A. Hudmon;J. Aronowski;S. Kolb;Neal Waxham
与Ca/钙调素依赖性蛋白激酶II（CaM-激酶）的自磷酸化相关的酶活性的时间依赖性损失被pH和ATP浓度改变。这些参数也影响了可溶性钙调素激酶进行自缔合，形成大的可沉淀酶的聚集体的程度。具体而言，在pH 6.5的0.01 mM ATP中的CaM-激酶的自磷酸化导致可沉淀酶的形成和70%的酶活性损失。在pH 7.5的类似条件下，该酶仅失去其活性的30%，并且未检测到可沉淀的酶。与0.01 mM ATP相比，在1 mM ATP中pH 6.5时，CaM-激酶的自磷酸化不会导致活性丧失或产生可沉淀的酶，即使自磷酸化的化学计量是相当的。在0.01 mM ATP中pH 6.5时CaM激酶自磷酸化的电子显微镜研究显示，直径为100-300 nm的颗粒聚集成分支复合物。钙调素激酶的失活和自我关联的影响，在体外的自磷酸化的条件下，这表明酶的催化和物理性质可能是敏感的ATP浓度和pH值的波动在体内。
The time-dependent loss in enzyme activity associated with the autophosphorylation of Ca/calmodulin-dependent protein kinase II (CaM-kinase) was altered by both pH and ATP concentration. These parameters also influenced the extent to which soluble CaM-kinase undergoes self-association to form large aggregates of sedimentable enzyme. Specifically, autophosphorylation of CaM-kinase in 0.01 mM ATP at pH 6.5 resulted in the formation of sedimentable enzyme and a 70% loss of enzyme activity. Under similar conditions at pH 7.5, the enzyme lost only 30% of its activity, and no sedimentable enzyme was detected. In contrast to 0.01 mM ATP, autophosphorylation of CaM-kinase at pH 6.5 in 1 mM ATP did not result in a loss of activity or the production of sedimentable enzyme, even though the stoichiometry of autophosphorylation was comparable. Electron microscopy studies of CaM-kinase autophosphorylated at pH 6.5 in 0.01 mM ATP revealed particles 100-300 nm in diameter that clustered into branched complexes. Inactivation and self-association of CaM-kinase were influenced by the conditions of autophosphorylation in vitro, suggesting that both the catalytic and physical properties of the enzyme may be sensitive to fluctuations in ATP concentration and pH in vivo.
登录
查看更多内容
DOI：
10.1016/s0021-9258(18)53160-4
发表时间：
1993-04
期刊：
The Journal of biological chemistry
影响因子：
--
作者：
R. Colbran
通讯作者：
R. Colbran
通过定点诱变分析多功能 Ca2/钙调蛋白依赖性蛋白激酶的抑制性自磷酸化。
DOI：
--
发表时间：
1992
期刊：
The Journal of biological chemistry
影响因子：
--
作者：
Hanson,PI;Schulman,H
通讯作者：
Schulman,H
Ca2/钙调蛋白对 II 型钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶的激活受到钙调蛋白结合域内苏氨酸自身磷酸化的抑制。
DOI：
--
发表时间：
1990
期刊：
The Journal of biological chemistry
影响因子：
--
作者：
Patton,BL;Miller,SG;Kennedy,MB
通讯作者：
Kennedy,MB
多功能 Ca2/钙调蛋白依赖性蛋白激酶的自磷酸化机制。
DOI：
--
发表时间：
1985
期刊：
The Journal of biological chemistry
影响因子：
--
作者：
Kuret,J;Schulman,H
通讯作者：
Schulman,H
单体 Ca2/钙调蛋白依赖性蛋白激酶 II 中 Thr-286 的诱变消除了 Ca2/钙调蛋白独立活性。
DOI：
10.1073/pnas.87.4.1273
发表时间：
1990
影响因子：
11.1
作者：
Waxham,MN;Aronowski,J;Westgate,SA;Kelly,PT
通讯作者：
Kelly,PT