活血解毒Ⅰ号方抗动脉粥样硬化的网络药理学分析及实验验证
活血解毒Ⅰ号方抗动脉粥样硬化的网络药理学分析及实验验证
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DOI：
10.20047/j.issn1673-7210.2022.33.01
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发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
薛梅
中科院分区：
文献类型：
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作者：
1 汤紫薇;谷依檬;吴艳艳;杨琳;薛梅
目的 基于网络药理学探索活血解毒Ⅰ号方治疗动脉粥样硬化的物质基础和作用机制，并进行实验验证。方法 通过中药系统药理学数据库与分析平台检索活血解毒Ⅰ号方活性成分及其靶点，采用Uniprot蛋白质数据库标准化蛋白质靶点信息。通过在线人类孟德尔遗传、Gene Cards、Drug Bank数据库获取动脉粥样硬化相关靶点基因，筛选药物和疾病共同靶点，构建“成分-靶点”网络并筛选关键活性成分。通过STRING平台构建共同靶点蛋白质-蛋白质相互作用网络，筛选关键靶点基因。采用Matascape数据库进行GO和KEGG通路富集分析，构建“药物-靶点-通路”多维网络图。选用SPF级8周龄雄性ApoE-/-小鼠30只，体重18～22 g，通过高脂饲料喂养12周建立动脉粥样硬化模型，按随机数字表法将其分为模型组、他汀组、活血解毒Ⅰ号方组，每组10只，另选相同周龄及遗传背景的雄性C57BL/6J小鼠10只作为正常对照组。他汀组予阿托伐他汀3.400 mg/(kg·d)，活血解毒Ⅰ号方组予药液2.171 g/(kg·d)，正常对照组、模型组予等量生理盐水，四组均灌胃12周。实验结束后采用比色法检测四组血脂指标，对主动脉行HE染色及斑块比例定量分析，Western blot检测四组主动脉组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、caspase-3和核因子-κBp65(NF-κBp65)蛋白表达水平。结果 共筛选出活血解毒Ⅰ号方活性成分25个，潜在靶点214个，与动脉粥样硬化疾病共同靶点118个。GO分析显示2 173个结果包括通路165条。活血解毒Ⅰ号方治疗动脉粥样硬化的关键活性成分包括槲皮素、黄芩素、β-谷甾醇、鞣花酸、小檗浸碱、非洲防己碱、小檗碱等，可调控TNF、AKT1、IL-6、VEGFA、TP53、IL-1B、JUN、CASP3、PTGS2、PPARG等相关靶点，并可能通过TNF、Toll样受体、NF-κB、HIF-1、PI3K-Akt、细胞凋亡、T细胞受体、MAPK、Foxo等信号通路对动脉粥样硬化的发生发展产生影响。实验结果显示，模型组血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)高于正常对照组，高密度脂蛋白胆固醇水平低于正常对照组，活血解毒Ⅰ号方组血清TC、TG、LDL-C低于模型组，差异有统计学意义(P <0.05)。主动脉根部HE染色结果显示，正常对照组主动脉根部无粥样斑块沉积，余各组主动脉根部管壁均可观察到不同程度的粥样斑块沉积。斑块比例定量分析显示，活血解毒Ⅰ号方组斑块面积占血管面积的比例低于模型组，差异有统计学意义(P<0.05)。模型组TNF-α、IL-6、caspase-3、NF-κBp65蛋白水平高于正常对照组，活血解毒Ⅰ号方组低于模型组，差异有统计学意义(P <0.05)。结论 本研究初步揭示了活血解毒Ⅰ号方治疗动脉粥样硬化的“多成分-多靶点-多通路”作用网络，实验验证其作用机制与抑制相关炎症通路及细胞凋亡有关，为活血解毒Ⅰ号方治疗动脉粥样硬化临床应用提供研究依据。