日本血吸虫成虫抗原通过ROS 诱导人LX - 2 肝 星状细胞NLRP3 炎症小体活化和胶原表达
日本血吸虫成虫抗原通过ROS 诱导人LX - 2 肝 星状细胞NLRP3 炎症小体活化和胶原表达
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DOI：
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发表时间：
2018
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
王勇
中科院分区：
文献类型：
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作者：
朱燕楠;缪婷婷;王伟;陆忠奎;刘劲峰;王勇
为了探讨日本血吸虫成虫抗原（ＳＷＡ） 对ＬＸ⁃２ 细胞ＮＬＲＰ３ 炎症小体活化和纤维化相关基因表达的.影响， 同时明确活性氧（ＲＯＳ） 在其中的作用， 本文首先采用不同浓度（０、２５、５０、１００ μｇ／ ｍＬ） 的ＳＷＡ.刺激ＬＸ⁃２ 细胞， 通过实时荧光定量ＰＣＲ （Ｒｅａｌ⁃ｔｉｍｅ ＰＣＲ） 和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 检测细胞中ＮＬＲＰ３、Ｃａｓｐａｓｅ⁃１、.ＩＬ⁃１β、α⁃ＳＭＡ 和ＣｏｌΙ 的基因和蛋白表达， ＥＬＩＳＡ 检测细胞ＩＬ⁃１β 的分泌水平。同时使用ＣＣＫ⁃８ （Ｃｅｌｌ.Ｃｏｕｎｔｉｎｇ Ｋｉｔ⁃８） 法检测细胞活性， 乳酸脱氢酶（ＬＤＨ） 检测试剂盒检测细胞ＬＤＨ 的释放。流式细胞术检测.ＳＷＡ 刺激对ＬＸ⁃２ 细胞中ＲＯＳ 产生的影响。之后使用ＲＯＳ 清除剂Ｎ⁃乙酰半胱氨酸（Ｎ⁃ａｃｅｔｙｌｃｙｓｔｅｉｎｅ， ＮＡＣ）.处理细胞， 检测ＮＬＲＰ３、ＩＬ⁃１β、Ｃａｓｐａｓｅ⁃１、α⁃ＳＭＡ、ＣｏｌΙ 基因和蛋白的表达水平。结果显示， 当ＳＷＡ 的.浓度达１００ μｇ／ ｍＬ 时， ＬＸ⁃２ 细胞内ＮＬＲＰ３、Ｃａｓｐａｓｅ⁃１、ＩＬ⁃１β、α⁃ＳＭＡ 和ＣｏｌΙ 的ｍＲＮＡ 的表达与对照组相.比均明显升高， 同时相关蛋白的表达和ＩＬ⁃１β 的分泌也显著升高。流式检测结果显示， ＳＷＡ 刺激ＬＸ⁃２ 细胞.后能显著增加细胞内ＲＯＳ 的生成， 并在ＮＡＣ 处理后， 可见明显抑制细胞内ＣｏｌΙ 和炎症小体活化相关的基.因和蛋白的表达。结果提示， ＳＷＡ 可以诱导ＬＸ⁃２ 细胞内炎症小体活化和胶原表达， 并且ＲＯＳ 反应可能在.介导ＮＬＲＰ３ 活化中发挥重要的作用。