Genetic code expansion for multiprotein complex engineering
Genetic code expansion for multiprotein complex engineering
复制标题
多蛋白复合工程的遗传密码扩展
DOI：
10.1038/nmeth.4032
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发表时间：
2016-12-01
期刊：
影响因子：
48
通讯作者：
Lemke, Edward A.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Koehler, Christine;Sauter, Paul F.;Lemke, Edward A.
我们提出了一种基于杆状病毒的蛋白质工程方法，该方法能够在昆虫细胞重组产生的真核蛋白质复合物中位点特异性引入独特的功能。我们展示了这种高效而强大的蛋白质生产平台“MultiBacTAG”的多功能性，（i）用于使用点击化学对目标蛋白质和生物制剂进行荧光标记，（ii）用于抗体的糖工程，以及（iii）用于使用单分子福斯特共振能量转移以及位点特异性交联策略的新型真核复合物的结构功能研究。
We present a baculovirus-based protein engineering method that enables site-specific introduction of unique functionalities in a eukaryotic protein complex recombinantly produced in insect cells. We demonstrate the versatility of this efficient and robust protein production platform, 'MultiBacTAG', (i) for the fluorescent labeling of target proteins and biologics using click chemistries, (ii) for glycoengineering of antibodies, and (iii) for structure-function studies of novel eukaryotic complexes using single-molecule Forster resonance energy transfer as well as site-specific crosslinking strategies.