Direct comparison of a genetically encoded sensor and small molecule indicator: implications for quantification of cytosolic Zn(2+).
Direct comparison of a genetically encoded sensor and small molecule indicator: implications for quantification of cytosolic Zn(2+).
复制标题
DOI：
10.1021/cb4003859
复制
发表时间：
2013-11-15
影响因子：
4
通讯作者：
Palmer AE
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Qin Y;Miranda JG;Stoddard CI;Dean KM;Galati DF;Palmer AE
荧光传感器是可视化和定量活细胞中分子和离子的强大工具。已经开发了各种小分子和遗传编码的传感器用于研究细胞内Zn 2+稳态和信号传导，但是没有直接的比较存在，使得研究人员难以确定用于给定应用的适当传感器。在这里，我们直接比较了广泛使用的小分子探针FluoZin-3和遗传编码的传感器ZapCY 2。我们证明，与FluoZin-3相比，ZapCY 2表现出明确的胞质定位，提供了Zn 2+浓度的估计，几乎没有变化，不干扰胞质Zn 2+水平，并表现出快速的Zn 2+响应动力学。ZapCY 2用于测量5种不同细胞类型中的Zn 2+浓度，揭示了与正常前列腺细胞相比，前列腺癌细胞中更高的胞质Zn 2+水平（尽管前列腺癌细胞中的总锌减少），表明了不同的调节机制。
Fluorescent sensors are powerful tools for visualizing and quantifying molecules and ions in living cells. A variety of small molecule and genetically encoded sensors have been developed for studying intracellular Zn2+ homeostasis and signaling, but no direct comparisons exist making it challenging for researchers to identify the appropriate sensor for a given application. Here we directly compare the widely used small molecule probe FluoZin-3 and a genetically encoded sensor, ZapCY2. We demonstrate that, in contrast to FluoZin-3, ZapCY2 exhibits a well defined cytosolic localization, provides estimates of Zn2+ concentration with little variability, does not perturb cytosolic Zn2+ levels, and exhibits rapid Zn2+ response dynamics. ZapCY2 was used to measure Zn2+ concentrations in 5 different cell types, revealing higher cytosolic Zn2+ levels in prostate cancer cells compared to normal prostate cells (although the total zinc is reduced in prostate cancer cells) , suggesting distinct regulatory mechanisms.
登录
查看更多内容
影响因子：
4.8
作者：
Brand, IA;Kleineke, J
通讯作者：
Kleineke, J
影响因子：
4
作者：
Bozym, Rebecca A.;Thompson, Richard B.;Fierke, Carol A.
通讯作者：
Fierke, Carol A.
影响因子：
4.7
作者：
Kiedrowski, Lech
通讯作者：
Kiedrowski, Lech
影响因子：
3.7
作者：
McCormick N;Velasquez V;Finney L;Vogt S;Kelleher SL
通讯作者：
Kelleher SL
影响因子：
3.6
作者：
Dineley, KE;Malaiyandi, LM;Reynolds, IJ
通讯作者：
Reynolds, IJ