IL-1β参与调控BCG 感染 RAW264.7细胞凋亡的研究
IL-1β参与调控BCG 感染 RAW264.7细胞凋亡的研究
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DOI：
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发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
邓光存
中科院分区：
文献类型：
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作者：
蔡卫卫;马臣杰;曾瑾;吴晓玲;邓光存
目的 白细胞介素－１β（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１β，ＩＬ－１β）属多肽类生长因子，主要由单核细胞和巨噬细胞分泌。ＩＬ－１β可参.与细胞分化、增殖等 多 种 细 胞 的 生 命 活 动，并 参 与 调 控 细 胞 凋 亡 过 程。 本 研 究 旨 在 探 讨ＩＬ－１β 参 与 卡 介 苗 （Ｂａｃｉｌｌｕｓ.Ｃａｌｍｅｔｔｅ－Ｇｕｅｒｉｎ，ＢＣＧ）诱导的小鼠巨噬细胞 ＲＡＷ２６４．７凋亡作用及其机制。 方法 设计并合成ＩＬ－１β的小干扰 ＲＮＡ.（ｓｉ－ＩＬ－１β），转染小鼠巨噬细胞 ＲＡＷ２６４．７后并用 ＢＣＧ 感 染，采 用 ＭＴＴ 法 检 测 ＲＡＷ２６４．７细 胞 存 活 率，ＥＬＩＳＡ 法 检 测.细胞培养液上清中ＩＬ－１β的分泌水平，ＤＣＦ法检测细胞内 ＲＯＳ水平，ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ／碘化丙啶（ｐｒｏｐｉｄｉｎｅｉｏｄｉｄｅ，ＰＩ）双.荧光染色法结合流式细胞仪检测细胞凋亡率，实时荧光 定 量 ＰＣＲ 和 Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法 检 测 凋 亡 相 关 因 子 Ｃａｓｐａｓｅ３、Ｂａｄ、.Ｂａｘ以及 Ｍｃｌ－１蛋白及其基因（ｍＲＮＡ）的表达。 结果 ＢＣＧ 感染巨噬细胞２４ｈ后，ＩＬ－１β表达水平极显著上调，并且.呈时间梯度依赖性（Ｐ＜０．０１）；同时，与对照相比，ＢＣＧ 感染后巨噬细胞存活率下降，约为３３％，而凋亡率显著上调到５８．.５６％（Ｐ＜０．０１），并且凋亡关键调控因子 Ｃａｓｐａｓｅ３、Ｂａｄ、Ｂａｘ的 ｍＲＮＡ 及蛋白表达水平显著上调（Ｐ＜０．０１），而抑凋亡蛋.白 Ｍｃｌ－１的表达水平显著下调（Ｐ＜０．０１），细胞内 ＲＯＳ富集（Ｐ＜０．０５），而ｓｉ－ＩＬ－１β处理可显著逆转由 ＢＣＧ 诱发的细胞.凋亡、ＲＯＳ含量富集及凋亡相关蛋白表达水平上调等。 结论 ＢＣＧ 可诱导细胞内ＩＬ－１β的表达；ＩＬ－１β通过上调促凋.亡蛋白Ｂａｄ、Ｂａｘ表达，下调抑凋亡蛋白 Ｍｃｌ－１表达，上调细胞内 ＲＯＳ的表达并参与调控ＢＣＧ 诱导的巨噬细胞 ＲＡＷ２６４．.７细胞凋亡。这为阐明ＩＬ－１β在 ＢＣＧ 诱导的细胞凋亡中的作用奠定了分子基础。