奶牛圆形、长形、成熟精子细胞微量RNA制备和含量分析

奶牛圆形、长形、成熟精子细胞微量RNA制备和含量分析
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DOI：
10.11843/j.issn.0366-6964.2016.08.004
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发表时间：
2016-02
期刊：
畜牧兽医学报
影响因子：
--
通讯作者：
王栋
王栋
中科院分区：
其他
文献类型：
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作者：
任小霞;陈晓丽;李秀岭;王艳;秦彤;王栋

文献摘要

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本研究旨在探究奶牛变形精子细胞获取方法、建立稳定奶牛精子RNA提取体系及分析单个生精细胞RNA含量变化。采用激光显微捕获技术结合冰冻切片,采集奶牛圆形、长形精子细胞样品,利用附睾尾精子浮游法获得成熟精子,通过对已报道的小鼠、奶牛及人类精子RNA制备方法的尝试和比较,获得RNeasy Kit最佳奶牛精子RNA制备方法,并用PicoPure RNA Isolation Kit对圆形和长形精子细胞进行RNA制备,筛选去除白细胞、上皮细胞等体细胞污染及基因组DNA污染的反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测方法