Transfection of Na,K-ATPase alpha-subunit: regulation of enzyme abundance.
Transfection of Na,K-ATPase alpha-subunit: regulation of enzyme abundance.
复制标题
Na,K-ATP酶α亚基的转染：酶丰度的调节。
DOI：
10.1139/o95-032
复制
发表时间：
1995
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Pressley,TA
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Shanbaky,NM;Pressley,TA
将胎儿转移至ADN辅助下的乳腺细胞中，可利用类似模型研究Na，K-ATP酶总量的调节。L 'ADN补充了大鼠α 1亚单位催化剂，并将其引入到瓦巴因单敏感细胞中。转染的细胞在含有正常浓度瓦巴因细胞因子的环境中存活的能力很强。Na，K-ATP酶在转染细胞膜上的特异性活性与策勒在细胞膜上的活性无显著差异。Cela认为，转染的亚单位α 1结果部分取代了酶功能中的亚单位α 1内源性，而不是简单地增加酶的总量。Western transfer utilisant des propeps specifiques confirmation que les quantités totales de la sous-unité α 1 dans les cellules témoins and les cellules transfectées sont similaires.此外，通过杂交分析，在转染细胞中的α 1亚单位中获得了一个更高的ARNm含量。Ces résultats qui 'il y a une compétition entre les sous-unités α1résultant de la transfection et les sous-unités α1endogènes pour l'association à la quantité limitée de sous-unité β et que les sous-unités α1non assembées sont degradées rapidement.Mots clés：transfert de gène à l'aide d'DNA，transfer Western，quantité totale d'une protéine，assembly de sous-unités. [Traduit par la rédaction]
Le transfert d'un gène dans des cellules de mammifères à l'aide d'ADN a été utilise comme modèle pour étudier la régulation de la quantité totale de la Na,K-ATPase. L'ADN complémentaire de la sous-unité catalytique α1de rat a été introduite dans des cellules de rein de singe sensibles à la ouabaïne. Les cellules transfectées ont été sélectionnées grâce à leur capacité de survivre dans un milieu contenant une concentration normalement cytotoxique de ouabaïne. L'activité spécifique de la Na,K-ATPase dans les membranes des cellules transfectées n'est pas significativement différente de celle se trouvant dans les membranes des cellules témoins. Cela suggère que la sous-unité α1résultant de la transfection remplace partiellement la sous-unité α1endogène dans l'enzyme fonctionnelle et qu'elle n'augmente pas simplement la quantité totale d'enzyme. Des transferts Western utilisant des anticorps spécifiques confirment que les quantités totales de la sous-unité α1dans les cellules témoins et les cellules transfectées sont similaires. Cependant, l'analyse de TARN total par hybridation démontre qu'il y a une plus grande quantité d'ARNm codant la sous-unité α1dans les cellules transfectées. Ces résultats suggèrent qu'il y a une compétition entre les sous-unités α1résultant de la transfection et les sous-unités α1endogènes pour l'association à la quantité limitée de sous-unité β et que les sous-unités α1non assemblées sont dégradées rapidement.Mots clés: transfert de gène à l'aide d'DNA, transfer Western, quantité totale d'une protéine, assemblage de sous-unités.[Traduit par la rédaction]