A vector platform for the rapid and efficient engineering of stable complex transgenes.
A vector platform for the rapid and efficient engineering of stable complex transgenes.
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DOI：
10.1038/srep34365
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发表时间：
2016-10-03
影响因子：
4.6
通讯作者：
Nelson PJ
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Jäckel C;Nogueira MS;Ehni N;Kraus C;Ranke J;Dohmann M;Noessner E;Nelson PJ
我们描述了一组质粒载体工具的生成，该工具允许在永生化和原代细胞中快速生成复杂相互作用的稳定转基因。特别重要的是包括通过报告盒（使用Gaussia荧光素酶）监测调节途径的激活状态的机制，通过多西环素去抑制控制额外的转基因表达。所得到的载体可用于评估调节途径激活，并且非常适合于调节途径串扰研究。该系统结合了MultiSite-Gateway克隆技术，用于快速生成载体，允许灵活选择启动子和转基因，以及Sleeping Beauty转座酶技术，用于将多个转基因有效掺入宿主细胞DNA中。载体和兼容的Gateway Entry克隆库可从非营利质粒库Addgene获得。
We describe the generation of a set of plasmid vector tools that allow the rapid generation of complex-interacting stable transgenes in immortalized and primary cells. Of particular importance is inclusion of a mechanism to monitor the activation status of regulatory pathways via a reporter cassette (using Gaussia Luciferase), with control of additional transgene expression through doxycycline de-repression. The resulting vectors can be used to assess regulatory pathway activation and are well suited for regulatory pathway crosstalk studies. The system incorporates MultiSite-Gateway cloning for the rapid generation of vectors allowing flexible choice of promoters and transgenes, and Sleeping Beauty transposase technology for efficient incorporation of multiple transgenes in into host cell DNA. The vectors and a library of compatible Gateway Entry clones are available from the non-profit plasmid repository Addgene.
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影响因子：
10.5
作者：
Meng Z;Moroishi T;Guan KL
通讯作者：
Guan KL
影响因子：
14.8
作者：
Ivics, Zoltan;Mates, Lajos;Izsvak, Zsuzsanna
通讯作者：
Izsvak, Zsuzsanna
影响因子：
4.4
作者：
Martinez, Fernando O.;Gordon, Siamon;Mantovani, Alberto
通讯作者：
Mantovani, Alberto
影响因子：
4.5
作者：
Mueller, I.;Kordowich, S.;Dominici, M.
通讯作者：
Dominici, M.
DOI：
10.1073/pnas.1512503112
发表时间：
2015-08-18
影响因子：
11.1
作者：
Schumann, Kathrin;Lin, Steven;Marson, Alexander
通讯作者：
Marson, Alexander