基于 lncRNA-UCA1/miR-187/MAPK8 通路 探讨加味柴胡疏肝汤治疗癫痫作用机制
基于 lncRNA-UCA1/miR-187/MAPK8 通路 探讨加味柴胡疏肝汤治疗癫痫作用机制
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DOI：
10.7661/j.cjim.20230804.024
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发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
刁丽梅
中科院分区：
文献类型：
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作者：
李瑞暖;谢苗莹;曾榕;刁丽梅
目的 观察加味柴胡疏肝汤（MCSF）对癫痫小鼠行为学的影响及其对长链非编码 RNA 尿路上皮癌相关基因 1（lncRNA-UCA1）、微小 RNA 187（miR-187）和 丝裂原激活蛋白激酶 8（MAPK8）的调控作用。方法 将 80 只小鼠随机分为正常组、模型组（盐酸匹罗卡品 180 mg/kg）、MCSF 组[7 g/（kg·d）]、MCSF[7 g（kg·d）]+miR-187 模 拟 剂 组（2 μL）、MCSF[7 g/（kg·d）]+miR-187 抑制剂组（2 μL）、MCSF[7 g/（kg·d）]+lncRNA-UCA1 模拟剂组（2 μL）、MCSF[7 g/（kg·d）]+lncRNAUCA1 抑制剂组（2 μL）、卡马西平（CBZ）组 [30 mg/（kg·d）]。采用匹罗卡品（180 mg/kg）诱导建立癫痫小鼠模型，抑制及过表达 lncRNA-UCA1（2 μL）和 miR-187（2 μL）后，给予对应药物：MCSF[7 g/（kg·d）]、卡马西平混悬液 [30 mg/（kg·d）] 或生理盐水 [20 mL/（kg·d）] 灌胃 2 周，.观察小鼠一般情况；行脑电图和水迷宫行为学实验；苏木精 - 伊红（HE）染色法观察造模前后海马病理学变化；逆转录 - 聚合酶链反应（RT-qPCR）检测小鼠海马 lncRNA-UCA1、miR-187 和 MAPK8 mRNA表达量；蛋白质免疫印迹法检测小鼠海马 MAPK8 及磷酸化水平变化。结果 与正常组比较，模型组小鼠体重减少，脑电图可观察到明显连续性痫性放电波，平台逃避潜伏期明显延长，穿越平台次数和目标象限停留时间减少（P<0.01，P<0.05），海马组织神经元疏松紊乱，模型组 miR-187 的表达水平降低，lncRNA-UCA1 和 MAPK8 基因表达水平升高（P<0.01），p-MAPK8 蛋白表达量明显增加（P<0.01）；与模型组比较，给药组干预 2 周后，小鼠体重增加，各组脑电波痫性放电波频率和强度明显减少，MCSF组、MCSF+miR-187 模拟剂组、MCSF+lncRNA-UCA1 抑制剂组和 CBZ 组平台逃避潜伏期缩短，穿越.平台次数增多（P<0.01，P<0.05），海马组织 miR-187 的表达水平升高，lncRNA-UCA1 和 MAPK8 基因表达水平降低（P<0.01），p-MAPK8 蛋白表达量均明显减少（P<0.01），MCSF+miR-187 抑制剂组lncRNA-UCA1 基因水平表达量降低（P<0.05）；MCSF+lncRNA-UCA1 模拟剂组 miR-187 升高（P<0.05）。结论 MCSF 可以减少癫痫小鼠痫性波，改善小鼠癫痫行为，发挥抗癫痫作用，其作用机制可能与通过抑制 lncRNA-UCA1 表达从而激活 miR-187，降低 MAPK8 水平有关。