Reversible and Tunable Photoswitching of Protein Function through Genetic Encoding of Azobenzene Amino Acids in Mammalian Cells.
Reversible and Tunable Photoswitching of Protein Function through Genetic Encoding of Azobenzene Amino Acids in Mammalian Cells.
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DOI：
10.1002/cbic.201800226
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发表时间：
2018-10-18
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Deiters A
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Luo J;Samanta S;Convertino M;Dokholyan NV;Deiters A
三种不同的偶氮苯苯丙氨酸具有不同的光化学性质的遗传编码，在人类细胞中实现使用工程化的吡咯赖氨酰tRNA/tRNA合成酶对。为了证明蛋白质功能的可逆光控制，偶氮苯被位点特异性地引入萤火虫荧光素酶中。应用计算策略来指导选择潜在的光开关位点，从而导致可逆控制的荧光素酶。活细胞中酶功能的直接可逆光开关已经通过遗传编码的光开关氨基酸实现。此外，新的偶氮苯类似物提供增强的热稳定性、高光转化和对可见光的响应性。这些小分子光开关可以可逆地光控蛋白质功能，具有优异的时空分辨率，并且可以通过计算确定掺入的优选位点，从而为研究生物过程提供了新的工具。
The genetic encoding of three different azobenzene phenylalanines with different photochemical properties was achieved in human cells using an engineered pyrrolysyl tRNA/tRNA synthetase pair. In order to demonstrate reversible light-control of protein function, azobenzenes were site-specifically introduced into firefly luciferase. Computational strategies were applied to guide selection of potential photoswitchable sites that lead to a reversibly controlled luciferase enzyme. Direct reversible photoswitching of enzymatic function in live cells has been accomplished through genetically encoded photoswitchable amino acids. In addition, the new azobenzene analogs provide enhanced thermal stability, high photoconversion, and responsiveness to visible light. These small molecule photoswitches can reversibly photocontrol protein function with excellent spatiotemporal resolution and preferred sites for incorporation can be computationally determined, thus providing a new tool for investigating biological processes.
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影响因子：
4.3
作者：
Knie, Christopher;Utecht, Manuel;Bleger, David
通讯作者：
Bleger, David
DOI：
10.1016/s1359-0278(98)00072-8
发表时间：
1998-01-01
期刊：
FOLDING & DESIGN
影响因子：
--
作者：
Dokholyan, NV;Buldyrev, SV;Shakhnovich, EI
通讯作者：
Shakhnovich, EI
DOI：
10.1152/physiol.00018.2008
发表时间：
2008-10
期刊：
Physiology (Bethesda, Md.)
影响因子：
--
作者：
Gorostiza P;Isacoff EY
通讯作者：
Isacoff EY
影响因子：
5.2
作者：
John AA;Ramil CP;Tian Y;Cheng G;Lin Q
通讯作者：
Lin Q
影响因子：
3.2
作者：
Geoffroy, Marie;Faure, Delphine;Baigl, Damien
通讯作者：
Baigl, Damien