基于理性设计提高假交替单胞菌κ-卡拉胶酶热稳定性
基于理性设计提高假交替单胞菌κ-卡拉胶酶热稳定性
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DOI：
10.7506/spkx1002-6630-20211129-358
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发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
朱艳冰
中科院分区：
文献类型：
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作者：
龙柳妃;苏羽;陈艳红;姜泽东;倪辉;李清彪;朱艳冰
对假交替单胞菌JMUZ2的κ-卡拉胶酶进行理性设计,以获得热稳定性提高的突变酶。用PoPMuSiC在线分析工具对假交替单胞菌κ-卡拉胶酶进行分析,筛选了10个单点突变体。利用定点突变获得突变酶基因,并对突变酶进行诱导表达、纯化及性质鉴定,筛选出酶比活力不降低且热稳定性提高的突变体K155A。热稳定性分析表明,在50、55 ℃和60 ℃分别处理40 min,突变酶残余酶活力分别是野生型酶的1.8、2.7倍和4.5倍。酶的结构及分子动力学模拟分析表明,酶分子疏水相互作用和结构刚性的增强是K155A突变体热稳定性提高的可能原因。通过理性设计获得假交替单胞菌κ-卡拉胶酶热稳定性提高的突变体K155A,对改善酶的性质、扩大κ-卡拉胶酶的应用范围以及κ-卡拉胶酶结构与功能关系研究具有重要意义。