基于 FAK/ ERK 途径探讨 NRP-1 对结直肠癌细胞的影响。
基于 FAK/ ERK 途径探讨 NRP-1 对结直肠癌细胞的影响。
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DOI：
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发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
刘思德
中科院分区：
文献类型：
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作者：
黄秀萍;赖依虹;林壁涛;滕斓;刘思德
目的 探究神经纤毛蛋白 - 1( neuropilin - 1,NRP - 1)对结直肠癌( colorectal cancer,CRC)细胞行为的作用,及其对.黏着斑激酶( focal adhesion kinase,FAK) / 胞外信号调节激酶( extracellular signal - regulated kinases,ERK) 信号途径的影响。 方法.将 CRC细胞系 DLD - 1 随机分为对照组、CT - 707 组、sh - NRP - 1 组、sh - NRP - 1 + CT - 707 组,按分组使用 sh - NRP - 1 慢病.毒液感染细胞与 FAK 抑制剂 CT - 707 处理细胞,通过荧光显微镜观察感染慢病毒后细胞内增强型绿色荧光蛋白表达情况,实时.荧光定量 PCR 和 Western blot 法检测细胞内 NRP - 1mRNA 与蛋白的表达变化。 CCK - 8 法和 EdU 染色检测细胞增殖能力,细胞.划痕实验观察细胞划痕愈合率,Transwell 实验检测细胞迁移与侵袭,Western blot 法测定细胞内 FAK / ERK 相关蛋白表达情况。.结果 感染 sh - NRP - 1 重组慢病毒的 DLD - 1 细胞中可见明显绿色荧光,细胞内 NRP - 1mRNA 相对表达量和蛋白相对表达量.均显著下调(P < 0. 05) ,表明转染成功。 与对照组比较,CT - 707 组和 sh - NRP - 1 组的细胞增殖活性显著下降,EdU 阳性百分.比显著降低,细胞划痕愈合率显著降低,细胞迁移数目与侵袭数目均显著减少,FAK 蛋白磷酸化水平和 ERK 蛋白磷酸化水平均.显著下调(P < 0. 05) ;与 sh - NRP - 1 组比较,sh - NRP - 1 + CT - 707 组细胞增殖活性显著下降,EdU 阳性百分比和细胞划痕愈.合率均显著降低,细胞迁移数目与 侵 袭 数 目 也 均 显 著 减 少,FAK 蛋 白 磷 酸 化 水 平 和 ERK 蛋 白 磷 酸 化 水 平 均 显 著 下 调 ( P <.0. 05) 。 结论 下调 NRP - 1 表达能够发挥抑制 CRC 细胞增殖、迁移及侵袭的作用,该机制可能与调控 FAK / ERK 信号转导途径.有关。