基于Wnt/β-catenin通路探究骨痹通方对软骨基质的保护作用及其机制
基于Wnt/β-catenin通路探究骨痹通方对软骨基质的保护作用及其机制
复制标题
DOI：
--
复制
发表时间：
--
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
陶庆文
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
鄢泽然;陈光耀;陈嘉琪;徐愿;罗静;陶庆文
背景 骨关节炎（OA）是一种常见的退行性关节病变，目前现代医学尚缺乏针对软骨损害的有效临床治疗手段。既往临床试验显示骨痹通方对骨关节炎具有较好的临床治疗效果，相关基础研究表明其对骨关节炎模型大鼠软骨具有良好的保护作用，但其具体机制尚不明确。目的 探究骨痹通方对OA细胞模型中与软骨基质降解密切相关的基质金属蛋白酶的干预作用，并通过检测Wnt/β-catenin通路相关蛋白探究其具体机制。方法 采用MTS法探究骨痹通方对SW1353细胞干预的最大浓度。SW1353细胞加入10ng/mL IL-1β致炎，建立OA模型后分别使用高中低剂量的骨痹通方进行干预。采用RT-PCR、Western Blot、ELISA方法分别检测细胞内MMP-1、-3、-13的 mRNA表达、细胞内蛋白质表达及培养上清液中释放的蛋白。进一步使用Wnt/β-catenin通路激活剂WAY-262611及炎性因子抑制剂地塞米松作为对照药物，检测细胞内MMP13、β-catenin的表达。结果 MTS增殖实验结果提示2500mg/L骨痹通方作为干预SW1353细胞的最大浓度。RT-PCR、Western Blot、ELISA结果表明，IL-1β组相对于空白对照组，MMP-1、-3、-13的mRNA表达、细胞内蛋白质表达量及培养上清液蛋白释放量明显升高，差异有统计学意义（P<0.05）。使用625、1250、2500 mg/L骨痹通方进行干预后，MMP-1、-3的mRNA表达、细胞内蛋白质表达及培养上清液蛋白释放量减少（P<0.05）；使用1250、2500 mg/L骨痹通方进行干预后，MMP-13的mRNA表达、细胞内蛋白质表达及培养上清液蛋白释放量减少（P<0.05）。IL-1β组相对于空白对照组，细胞内β-catenin蛋白含量升高（P<0.05）。而使用地塞米松能够明显降低β-catenin蛋白含量，且抑制MMP13蛋白的表达（P<0.05）。结论 骨痹通方能够抑制IL-1β诱导的骨关节炎细胞模型MMP-1、-3、-13的表达从而发挥OA软骨保护作用；而对被激活的Wnt/β-catenin通路的抑制作用可能是其具体机制。