三种方法诱导猪DFAT成肌再分化效果比较研究
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通讯作者：
宋学雄
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作者：
宋学雄
本研究用三种方法比较诱导猪去分化脂肪细胞（DFAT）成肌分化的效果，旨在筛选诱导猪DFAT成肌分化的较优方法。（方法）采用糖皮质激素法、Galectin-1法、5-aza法分别诱导猪DFAT成肌分化6d、15d和21d，并分别用倒置显微镜观察分化的细胞形态；诱导21d后用间接免疫荧光法检测成肌特异蛋白Desmin和MyHC的表达，用Real-time qPCR检测MyoG mRNA的表达,每种方法诱导3组，每组重复检测3次。（结果）诱导细胞的形态学观察显示，Galectin-1法诱导的肌管形态最佳，多核细胞数量也最多；5-aza法次之，但诱导过程中细胞死亡率较高；糖皮质激素法诱导的细胞形态不规则，多形成放射状突起，而且出现较多成脂分化细胞。间接免疫荧光分析显示，Galectin-1法和糖皮质激素法诱导的细胞Desmin、MyHC和MyoG mRNA都呈强阳性表达，而在5-aza法诱导的细胞这两种蛋白和基因都呈弱表达。（结论）从诱导细胞的肌管形态，分化的纯度，生存能力，特异蛋白和基因的表达量等综合判断，诱导猪DFAT成肌分化，Galectin-1法优于糖皮质激素法和5-aza法。