血小板微囊泡对人微血管内皮细胞功能的影响
血小板微囊泡对人微血管内皮细胞功能的影响
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DOI：
10.16016/j.1000-5404.201911253
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发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
胡厚源
中科院分区：
文献类型：
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作者：
潘丽娜;汪泽扬;陈丽媛;张润军;肇炜博;胡厚源
目的探讨血小板微囊泡(platelet microvesicles,PMVs)对人微血管内皮细胞(human microvascular endothelial cells,HMECs)功能的影响。方法取柠檬酸钠抗凝的健康人全血分离血小板,采用二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)激活血小板产生PMVs,然后以不同浓度(10、20、50 μg/mL)的PMVs作用于HMECs,并设立台式液作为空白对照组(control,Con组)和不含PMVs的上清组(supernatants,Sup组) 。ELISA检测HMECs培养上清中血栓素A2(thromboxane A2,TXA2)和前列腺素I2(prostaglandin I2,PGI2)的稳定代谢产物TXB2和6-keto-PGF1α、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)和E-选择素(E-selectin)的水平。Western blot检测HMECs中内皮素-1(endothelin-1,ET-1)和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)的磷酸化水平。荧光探针检测HMECs中一氧化氮(nitric oxide,NO)含量。采用流式细胞仪定量检测HMECs培养上清中内皮微囊泡(endothelial microvesicles,EMVs)的含量。结果与Con组和Sup组比较,PMVs可使HMECs培养上清TXB2的水平升高(P <0.05),6 -keto-PGF1α的水平降低(P <0.05),均呈时间和剂量依赖性;PMVs可使HMECs中eNOS的磷酸化水平和NO含量显著下降,ET-1水平升高;经PMVs作用后,HMECs培养上清中ICAM-1、VCAM-1和E-selectin的表达水平亦显著升高(P <0.05) 。与Con组和Sup组比较,50 μg/mL PMVs作用于HMECs 24 h后,培养上清中EMVs的水平显著增加(P <0.05) 。结论PMVs可导致微血管内皮细胞的功能紊乱和损伤。这可能是血小板参与微循环功能障碍发生的重要机制之一。