HuR Uses AUF1 as a Cofactor To Promote p16INK4 mRNA Decay
HuR Uses AUF1 as a Cofactor To Promote p16INK4 mRNA Decay
复制标题
DOI：
10.1128/mcb.00169-10
复制
发表时间：
2010-08-01
影响因子：
5.3
通讯作者：
Wang, Wengong
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Chang, Na;Yi, Jie;Wang, Wengong
在这项研究中，我们发现 HuR 会破坏 p16(INK4) mRNA 的稳定性。尽管敲低 HuR 或 AUF1 会增加 p16 的表达，但同时敲低 AUF1 和 HuR 的效果却要弱得多。 Ago2（RNA 诱导沉默复合物 (RISC) 的一个组成部分）的敲除可稳定 p16 mRNA。 HuR 的敲除减少了 p16 3' 非翻译区 (3'UTR) 与 AUF1 的关联，反之亦然。虽然 HuR 或 AUF1 的敲低减少了 Ago2 与 p16 3'UTR 的关联，但 Ago2 敲低对 HuR 或 AUF1 与 p16 3'UTR 的结合没有影响。 EGFP-p16嵌合报告转录本的使用表明，p16 mRNA的衰变取决于p16 3'UTR中存在的茎环结构，因为HuR和AUF1使带有野生型序列的EGFP衍生嵌合转录本不稳定，但不破坏茎环结构突变的转录本。在衰老和 HuR 沉默的 IDH4 人二倍体成纤维细胞中，EGFP-p16 3'UTR 转录物更加稳定。我们的结果表明，HuR 通过招募 RISC 来破坏 p16 mRNA 的稳定性，这种效应取决于 p16 3'UTR 的二级结构，并且需要 AUF1 作为辅助因子。
In this study, we show that HuR destabilizes p16(INK4) mRNA. Although the knockdown of HuR or AUF1 increased p16 expression, concomitant AUF1 and HuR knockdown had a much weaker effect. The knockdown of Ago2, a component of the RNA-induced silencing complex (RISC), stabilized p16 mRNA. The knockdown of HuR diminished the association of the p16 3' untranslated region (3'UTR) with AUF1 and vice versa. While the knockdown of HuR or AUF1 reduced the association of Ago2 with the p16 3'UTR, Ago2 knockdown had no influence on HuR or AUF1 binding to the p16 3'UTR. The use of EGFP-p16 chimeric reporter transcripts revealed that p16 mRNA decay depended on a stem-loop structure present in the p16 3'UTR, as HuR and AUF1 destabilized EGFP-derived chimeric transcripts bearing wild-type sequences but not transcripts with mutations in the stem-loop structure. In senescent and HuR-silenced IDH4 human diploid fibroblasts, the EGFP-p16 3'UTR transcript was more stable. Our results suggest that HuR destabilizes p16 mRNA by recruiting the RISC, an effect that depends on the secondary structure of the p16 3'UTR and requires AUF1 as a cofactor.