Molecular Cloning, Lentiviral Transduction, and Expression of Recombinant ADAMTSL2 and ADAMTSL4.

Molecular Cloning, Lentiviral Transduction, and Expression of Recombinant ADAMTSL2 and ADAMTSL4.
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重组 ADAMTSL2 和 ADAMTSL4 的分子克隆、慢病毒转导和表达。

DOI:
10.1007/978-1-4939-9698-8_12
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发表时间:
2020
期刊:
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
影响因子:
--
通讯作者:
Singh M
Singh M
中科院分区:
--
文献类型:
--
作者:
Singh M

文献摘要

参考文献

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慢病毒系统已经证明在体外、体内以及临床试验中在将基因序列递送和长期整合到几种细胞类型的基因组中方面是有利的。在这里,我们详细介绍了ADAMTSL 2和ADAMTSL 4的分子克隆到人类免疫缺陷病毒(HIV)衍生的pCDH慢病毒系统中所涉及的协议。我们还描述了ADAMTSL 2和ADAMTSL 4的慢病毒转导到哺乳动物HEK 293-EBNA细胞中以产生稳定的细胞系,以及它们的重组表达。
Lentiviral systems have proven advantageous in the delivery and long-term integration of gene sequences into the genome of several cell types in vitro, in vivo, as well as in clinical trials. Here we detail the protocols involved in the molecular cloning of ADAMTSL2 and ADAMTSL4 into the human immunodeficiency virus (HIV)-derived pCDH lentiviral system. We also describe the lentiviral transduction of ADAMTSL2 and ADAMTSL4 into mammalian HEK293-EBNA cells to create stable cell lines, as well as their recombinant expression.
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