耐碱性蛋白A色谱配基的构建及性能评价

耐碱性蛋白A色谱配基的构建及性能评价
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DOI:
10.11949/j.issn.0438-1157.20170366
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发表时间:
2017
期刊:
化工学报
影响因子:
--
通讯作者:
史清洪
史清洪
中科院分区:
其他
文献类型:
--
作者:
管志龙;白姝;孙彦;史清洪

文献摘要

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提出了优化分子内作用力提高蛋白A(SpA)的结构域Z分子稳定性的方法,构建了突变结构域Zʹ 和Zʺ 。圆二色光谱分析结果表明,突变结构域具有与结构域Z 一致的特征峰,但突变结构域Zʹ 中α-螺旋含量明显高于突变结构域Zʺ 。在pH 6.0下,突变结构域Zʹ 的热转变温度(Tm)较结构域Z提高了3.9℃,而突变结构域Zʺ的Tm值仅提高了1.6℃。这表明,突变结构域Zʹ 中第12 位引入疏水性更大的Ile 残基提高了结构域分子的稳定性。色谱介质耐碱性实验结果表明,突变结构域Zʹ 具有更好的耐碱性,其耐碱性在突变结构域Zʹ 四串联体融合蛋白中得到了进一步提升。研究工作为SpA 色谱配基的分子改造提供了新思路.