Establishment of a fluorescent in situ hybridization assay for imaging hepatitis B virus nucleic acids in cell culture models.
Establishment of a fluorescent in situ hybridization assay for imaging hepatitis B virus nucleic acids in cell culture models.
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细胞培养模型中乙型肝炎病毒核酸荧光原位杂交检测方法的建立
DOI：
10.1038/emi.2017.84
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发表时间：
2017-11-08
影响因子：
13.2
通讯作者：
Yuan Z
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Zhang X;Yue L;Zhang Z;Yuan Z
虽然慢性肝炎B仍然是一个全球性的公共卫生问题，详细的时空动态的关键分子事件导致的增殖和外出的B型肝炎病毒（HBV）仍然在很大程度上不清楚。在此之前，我们开发了一种显色原位杂交法，用于检测临床肝活检中的HBV RNA、DNA和共价闭合环状DNA。在这里，我们报告建立了一个荧光原位杂交方法的可视化的HBV RNA，HBV核心颗粒DNA和核内DNA在四环素诱导的HBV复制系统（HepAD 38）和从头感染系统（HepG 2-NTCP）。使用3D-STORM（三维随机光学重建显微镜），我们能够获得具有改进空间分辨率的HBV RNA和DNA图像，从而可以深入分析复杂亚细胞区室中的关键病毒学事件。总之，这些技术应该有助于更深入地了解HBV生命周期的分子事件，并揭示病毒-宿主相互作用的复杂机制。Emerging Microbes & Infections（2017）6，e98; doi：10.1038/emi.2017.84;在线发布2017年11月8日
While chronic hepatitis B remains a global public health problem, the detailed spatiotemporal dynamics of the key molecular events leading to the multiplication and egress of hepatitis B virus (HBV) are still largely unclear. Previously, we developed a chromogenic in situ hybridization assay for detection of HBV RNA, DNA and covalently closed circular DNA in clinical liver biopsies. Here, we report the establishment of a fluorescent in situ hybridization method for the visualization of HBV RNA, HBV core particle DNA and intranuclear DNA in a tetracycline-inducible HBV replication system (HepAD38) and a de novo infection system (HepG2-NTCP). Using 3D-STORM (three-dimensional stochastic optical reconstruction microscopy), we were able to obtain images of HBV RNA and DNA with improved spatial resolution allowing in-depth analyses of key virological events within complex subcellular compartments. Taken together, these techniques should facilitate a deeper understanding of the molecular events of the HBV life cycle and shed new light on the intricate mechanisms of virus–host interactions. Emerging Microbes & Infections (2017) 6, e98; doi:10.1038/emi.2017.84; published online 8 November 2017
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影响因子：
3.7
作者：
Ramanan V;Trehan K;Ong ML;Luna JM;Hoffmann HH;Espiritu C;Sheahan TP;Chandrasekar H;Schwartz RE;Christine KS;Rice CM;van Oudenaarden A;Bhatia SN
通讯作者：
Bhatia SN
影响因子：
3.7
作者：
Shaffer SM;Wu MT;Levesque MJ;Raj A
通讯作者：
Raj A
DOI：
10.3390/v9050125
发表时间：
2017-05-22
期刊：
Viruses
影响因子：
--
作者：
Schreiner S;Nassal M
通讯作者：
Nassal M
DOI：
10.1007/978-1-4939-6700-1_10
发表时间：
2017-01-01
期刊：
HEPATITIS B VIRUS: METHODS AND PROTOCOLS
影响因子：
--
作者：
Calabrese, Diego;Wieland, Stefan F.
通讯作者：
Wieland, Stefan F.
影响因子：
5.4
作者：
Gao, Weifan;Hu, Jianming
通讯作者：
Hu, Jianming