CRISPR-Mediated Cassette Exchange (CriMCE): A Method to Introduce and Isolate Precise Marker-Less Edits.
CRISPR-Mediated Cassette Exchange (CriMCE): A Method to Introduce and Isolate Precise Marker-Less Edits.
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CRISPR 介导的盒交换 (CriMCE)：一种引入和隔离精确无标记编辑的方法。
DOI：
10.1089/crispr.2022.0026
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发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Morianou I
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Morianou I
在昆虫基因组中引入小的未标记编辑对于研究重要生物性状的分子基础至关重要，例如对杀虫剂的抗性和遗传控制策略。CRISPR基因组工程的进展使这成为可能，但由于编辑率低和缺乏选择性标记，大多数实验室都非常费力。为了促进精确的无标记编辑的生成和分离，我们开发了一种基于CRISPR介导的盒交换（CriMCE）的两步法，用于感兴趣的变体的标记的占位符。与以前的方法相比，这种策略可以用于引入更广泛的潜在编辑，同时整合工作流。我们提出了原理证明，CriMCE是一个强大的工具，通过将三个单核苷酸多态性变体工程化到冈比亚按蚊的基因组中，编辑率比同源定向修复或引物编辑高5-41倍。
The introduction of small unmarked edits to the genome of insects is essential to study the molecular underpinnings of important biological traits, such as resistance to insecticides and genetic control strategies. Advances in CRISPR genome engineering have made this possible, but prohibitively laborious for most laboratories due to low rates of editing and the lack of a selectable marker. To facilitate the generation and isolation of precise marker-less edits we have developed a two-step method based on CRISPR-mediated cassette exchange (CriMCE) of a marked placeholder for a variant of interest. This strategy can be used to introduce a wider range of potential edits compared with previous approaches while consolidating the workflow. We present proof-of-principle that CriMCE is a powerful tool by engineering three single nucleotide polymorphism variants into the genome ofAnopheles gambiae, with 5–41 × higher rates of editing than homology-directed repair or prime editing.
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DOI：
10.1101/2020.08.05.232348
发表时间：
2020-08
期刊：
Proceedings of the National Academy of Sciences
影响因子：
--
作者：
Justin A. Bosch;Gabriel Birchak;N. Perrimon
通讯作者：
Justin A. Bosch;Gabriel Birchak;N. Perrimon
DOI：
10.1098/rspb.2020.0838
发表时间：
2020-05-27
影响因子：
4.7
作者：
Samantsidis, George-Rafael;Panteleri, Rafaela;Vontas, John
通讯作者：
Vontas, John
影响因子：
4.6
作者：
Vella MR;Gunning CE;Lloyd AL;Gould F
通讯作者：
Gould F
蚊子埃及埃及的基因组工程与CRISPR-Cas9。
影响因子：
8.8
作者：
Kistler KE;Vosshall LB;Matthews BJ
通讯作者：
Matthews BJ
DOI：
10.1073/pnas.2010214117
发表时间：
2020-09-15
影响因子：
11.1
作者：
Carballar-Lejarazú R;Ogaugwu C;Tushar T;Kelsey A;Pham TB;Murphy J;Schmidt H;Lee Y;Lanzaro GC;James AA
通讯作者：
James AA