RNAi沉默CsHB1降低茶树叶片愈伤组织咖啡碱积累

RNAi沉默CsHB1降低茶树叶片愈伤组织咖啡碱积累
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DOI：
10.16420/j.issn.0513-353x.2020-0242
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发表时间：
2020
期刊：
园艺学报
影响因子：
--
通讯作者：
陈忠正
陈忠正
中科院分区：
其他
文献类型：
--
作者：
康馨;刘平;马雯慧;张媛媛;林晓蓉;李斌;陈忠正

文献摘要

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以‘英红9号'茶树叶片为材料,克隆HD-Zip转录因子基因CsHB1,原核表达CsHB1重组蛋白,利用本氏烟草进行CsHB1表达蛋白的亚细胞定位;构建CsHB1的RNAi转基因载体,经农杆菌介导转化‘英红9号'茶树叶片愈伤组织,并对沉默CsHB1愈伤组织系进行基因表达分析和咖啡碱含量测定。结果表明,克隆基因与NCBI登记的‘龙井43'茶树CsHB1(MF033534)有6个碱基差异,但编码相同的氨基酸序列;原核诱导表达获得CsHB1的49 kD不可溶蛋白;将CsHB1蛋白亚细胞定位于细胞核和细胞质。在沉默表达CsHB1愈伤组织中,CsHB1表达显著下降,催化茶叶咖啡碱合成的N-甲基转移酶基因yhNMT1表达下调,愈伤组织中咖啡碱含量显著降低。推测转录因子基因CsHB1的沉默抑制了靶基因yhNMT1的表达,进而降低‘英红9号'愈伤组织中咖啡碱的合成积累。