低剂量LPS通过上调巨噬细胞TLR4表达促进非酒精性脂肪性肝炎进展
低剂量LPS通过上调巨噬细胞TLR4表达促进非酒精性脂肪性肝炎进展
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DOI：
10.16016/j.1000-5404.202105117
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发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
梁淑娟
中科院分区：
文献类型：
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作者：
于洋;付晓燕;吴艳红;许虎;杜宪红;吴沛恩;崔瑞翔;程丽霞;梁淑娟
目的探讨LPS在促进非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)中的作用及相关机制。方法6 ~ 8周龄B6.WT小鼠分别给予正常饲料(ND组) 、高脂饲料(HFD组)和HFD联合LPS注射(HFD+LPS组) 。HFD+LPS组每周1次腹腔注射LPS(0111 ∶ B4,1.25 μg/g体质量),其他两组注射等体积生理盐水,饲养10周。酶法检测血清和肝组织TG、TC、ALT、AST水平,油红O染色观察肝内脂质沉积; ELISA法、RT-qPCR检测血清和肝组织IL-1β、TNF-α、CCL5、CCL2、CCL4水平; HE染色观察肝组织病理变化和炎症细胞浸润;免疫荧光(immunofluorescence,IF)观察肝内巨噬细胞、中性粒细胞浸润及TLR4蛋白表达;流式细胞术(flow cytometry,FCM)观察肝脏浸润单个核细胞中巨噬细胞及中性粒细胞比例。结果HFD组血清TG、TC水平显著高于ND组(P均<0.05) 。HFD+LPS组肝内脂质沉积以及TG、TC水平显著高于HFD组(P均<0.01),肝脏细胞空泡样变、炎症细胞浸润更为明显,NAS评分(P<0.05)和肝脏单个核细胞数(P<0.01)显著高于HFD组。同时,IF及FCM检测证实肝脏巨噬细胞、中性粒细胞浸润显著多于HFD组(P均<0.05),HFD+LPS组血清中IL-1β、TNF-α、 CCL5、CCL2、CCL4水平显著高于HFD组(P<0.05);肝组织中IL-1β、CCL5、CCL2的蛋白和mRNA水平均显著高于HFD组(P均<0.05) 。免疫荧光结果提示LPS作用后肝组织中TLR4呈现明显的细胞膜转位,且TLR4与巨噬细胞共定位显示,HFD+LPS组巨噬细胞表面TLR4表达显著高于HFD组(P<0.01) 。结论LPS通过诱导趋化因子及促炎因子释放,募集以巨噬细胞为主的炎性细胞浸润,从而加重HFD小鼠NASH进程;其机制可能与上调巨噬细胞表面TLR4表达有关。