Switchable genome editing via genetic code expansion.
Switchable genome editing via genetic code expansion.
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可切换基因组编辑通过遗传代码扩展。
DOI：
10.1038/s41598-018-28178-3
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发表时间：
2018-07-03
影响因子：
4.6
通讯作者：
Perry ACF
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Suzuki T;Asami M;Patel SG;Luk LYP;Tsai YH;Perry ACF
通过CRISPR-Cas9进行基因组编辑的多种应用需要严格的调控，因此已经产生了Cas9变体，其活性响应于小配体、温度或光。然而，这些方法通常是不切实际的，例如在临床治疗性基因组原位编辑或基因驱动中，其中环境相容性控制是至关重要的。考虑到这一点，我们开发了可遗传的Cas9介导的哺乳动物基因组编辑，它由廉价的赖氨酸衍生物Lys（Boc）（BOC）强烈控制。遗传密码扩增允许非生理性BOC掺入，使得Cas9（Cas9 BOC）仅在BOC暴露后在培养的体细胞中以全长活性形式表达。当Cas9 BOC在小鼠胚胎发育开始时从cRNA或Cas9 BOC转基因雌性表达时，发生转基因和天然基因组基因座的严格BOC依赖性、可遗传编辑。本文报道的严格控制的Cas9编辑系统有望具有广泛的应用，并且是在大地理范围内进行有目的的时空基因驱动调控的第一步。
Multiple applications of genome editing by CRISPR-Cas9 necessitate stringent regulation and Cas9 variants have accordingly been generated whose activity responds to small ligands, temperature or light. However, these approaches are often impracticable, for example in clinical therapeutic genome editing in situ or gene drives in which environmentally-compatible control is paramount. With this in mind, we have developed heritable Cas9-mediated mammalian genome editing that is acutely controlled by the cheap lysine derivative, Lys(Boc) (BOC). Genetic code expansion permitted non-physiological BOC incorporation such that Cas9 (Cas9BOC) was expressed in a full-length, active form in cultured somatic cells only after BOC exposure. Stringently BOC-dependent, heritable editing of transgenic and native genomic loci occurred when Cas9BOC was expressed at the onset of mouse embryonic development from cRNA or Cas9BOC transgenic females. The tightly controlled Cas9 editing system reported here promises to have broad applications and is a first step towards purposed, spatiotemporal gene drive regulation over large geographical ranges.
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影响因子：
64.8
作者：
Konermann S;Brigham MD;Trevino AE;Joung J;Abudayyeh OO;Barcena C;Hsu PD;Habib N;Gootenberg JS;Nishimasu H;Nureki O;Zhang F
通讯作者：
Zhang F
DOI：
10.1126/science.aaa5945
发表时间：
2015-04-24
期刊：
Science (New York, N.Y.)
影响因子：
--
作者：
Gantz VM;Bier E
通讯作者：
Bier E
影响因子：
56.9
作者：
Jinek, Martin;Chylinski, Krzysztof;Charpentier, Emmanuelle
通讯作者：
Charpentier, Emmanuelle
影响因子：
15
作者：
Hemphill J;Borchardt EK;Brown K;Asokan A;Deiters A
通讯作者：
Deiters A
工程热点分析确定了变构 CRISPR-Cas9 开关。
影响因子：
46.9
作者：
Oakes BL;Nadler DC;Flamholz A;Fellmann C;Staahl BT;Doudna JA;Savage DF
通讯作者：
Savage DF