Adenosine Monophosphate Binding Stabilizes the KTN Domain of the Shewanella denitrificans Kef Potassium Efflux System.
Adenosine Monophosphate Binding Stabilizes the KTN Domain of the Shewanella denitrificans Kef Potassium Efflux System.
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DOI：
10.1021/acs.biochem.7b00300
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发表时间：
2017-08-15
期刊：
影响因子：
2.9
通讯作者：
Conway SJ
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Pliotas C;Grayer SC;Ekkerman S;Chan AKN;Healy J;Marius P;Bartlett W;Khan A;Cortopassi WA;Chandler SA;Rasmussen T;Benesch JLP;Paton RS;Claridge TDW;Miller S;Booth IR;Naismith JH;Conway SJ
配体结合是蛋白质最基本的特性之一。配体的功能分为三种基本类型：底物、调节分子和对蛋白质稳定性、反应性或酶-底物复合物形成至关重要的辅因子。细菌中钾离子运动的调节主要受调节配体的控制，这些配体控制相关通道和转运体，这些通道和转运体具有含有罗斯曼折叠（RFs）的亚基或结构域。在这里，我们证明单磷酸腺苷（AMP）与二聚体细菌钾外排系统（Kef）的两个rf结合，并在其中发挥结构作用。我们得出结论，AMP结合具有高亲和力，确保该位点在细胞中的任何时候都被完全占据。我们证明，失去结合AMP的能力会导致蛋白质和二聚体的不稳定性和随之而来的功能丧失。Kef系统功能是通过在二聚体亚基之间的界面上相对低亲和力的谷胱甘肽基配体的可逆结合来调节的。我们认为这个界面结合位点本身是稳定的，至少部分是由AMP结合稳定的。
Ligand binding is one of the most fundamental properties of proteins. Ligand functions fall into three basic types: substrates, regulatory molecules, and cofactors essential to protein stability, reactivity, or enzyme–substrate complex formation. The regulation of potassium ion movement in bacteria is predominantly under the control of regulatory ligands that gate the relevant channels and transporters, which possess subunits or domains that contain Rossmann folds (RFs). Here we demonstrate that adenosine monophosphate (AMP) is bound to both RFs of the dimeric bacterial Kef potassium efflux system (Kef), where it plays a structural role. We conclude that AMP binds with high affinity, ensuring that the site is fully occupied at all times in the cell. Loss of the ability to bind AMP, we demonstrate, causes protein, and likely dimer, instability and consequent loss of function. Kef system function is regulated via the reversible binding of comparatively low-affinity glutathione-based ligands at the interface between the dimer subunits. We propose this interfacial binding site is itself stabilized, at least in part, by AMP binding.
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影响因子：
64.8
作者：
ADAMS, MJ;FORD, GC;WONACOTT, AJ
通讯作者：
WONACOTT, AJ
影响因子：
4.8
作者：
Kroening, Nadine;Willenborg, Marion;Bakker, Evert P.
通讯作者：
Bakker, Evert P.
DOI：
10.1085/jgp.200609655
发表时间：
2007-02
期刊：
The Journal of general physiology
影响因子：
--
作者：
Li Y;Berke I;Chen L;Jiang Y
通讯作者：
Jiang Y
影响因子：
16.2
作者：
Jiang, YX;Pico, A;MacKinnon, R
通讯作者：
MacKinnon, R
DOI：
10.1016/j.str.2009.03.018
发表时间：
2009-06-10
期刊：
Structure (London, England : 1993)
影响因子：
--
作者：
Roosild TP;Castronovo S;Miller S;Li C;Rasmussen T;Bartlett W;Gunasekera B;Choe S;Booth IR
通讯作者：
Booth IR