卵巢癌顺铂敏感与耐药细胞ClC-3蛋白表达及通道功能的差异
卵巢癌顺铂敏感与耐药细胞ClC-3蛋白表达及通道功能的差异
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DOI：
10.3969/j.issn.1000-4718.2019.05.003
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发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
高绿芬
中科院分区：
文献类型：
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作者：
封洁珠;李恩泽;彭子瀚;裴一飞;朱林燕;高绿芬
目的:从分子和细胞水平研究卵巢癌顺铂敏感(a2780)及耐药(a2780cp)细胞中ClC-3氯通道蛋白表达及通道功能的差异。方法:MTT 法检测人卵巢癌a2780和a2780cp 细胞对顺铂敏感性的差异;real-time PCR法检测ClC 氯通道家族在a2780和a2780cp 细胞中的mRNA 表达;Western blot 检测ClC-3蛋白的表达;免疫荧光法观察ClC-3蛋白在a2780和a2780cp 细胞的分布;全细胞膜片钳技术记录细胞氯电流。结果:(1)a2780和a2780cp细胞对顺铂的敏感性存在差异,其IC_(50)值分别为5μmol /L和20μmol /L(P <0.01);(2)对ClC 氯通道家族mRNA表达的检测结果显示,a2780和a2780cp 细胞主要表达ClC-3,且在a2780cp 细胞中ClC-3mRNA 表达显著减少(P <0.01);(3)在蛋白水平上,与a2780细胞相比,a2780cp 细胞的ClC-3蛋白表达量显著降低(P <0.01);(4)免疫荧光显示ClC-3在a2780细胞中主要分布在胞膜上,而在a2780cp 细胞中则主要表达在胞质内;(5)顺铂能激活a2780细胞的氯通道,产生ClC-3介导的氯电流,但在a2780cp 细胞中则不能;(6)ClC-3siRNA 处理a2780细胞后,顺铂诱导的氯电流则不再出现。结论:ClC-3氯通道在顺铂敏感和耐药的卵巢癌细胞蛋白分布、表达和功能上存在差异,可能是引起顺铂耐药的潜在机制之一。