Unfoldase-mediated protein translocation through an α-hemolysin nanopore.
Unfoldase-mediated protein translocation through an α-hemolysin nanopore.
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DOI：
10.1038/nbt.2503
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发表时间：
2013-03
影响因子：
46.9
通讯作者：
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
使用纳米孔来测序生物聚合物是十多年前提出的。基于酶的DNA易位控制和使用修饰的生物孔的DNA核苷酸解析的最新进展已经满足了功能性纳米孔DNA测序装置的两个技术要求。还设想了蛋白质的纳米孔测序。虽然蛋白质已被证明可以通过纳米孔移动，但尚未证明展开蛋白质进行性易位的技术。在这里，我们描述了使用AAA+解折叠酶ClpX通过α-溶血素（α-HL）孔控制蛋白质的解折叠和易位。在易位过程中检测到单个工程蛋白的序列依赖性特征。这些结果表明，分子马达可以重复驱动蛋白质通过模型纳米孔-蛋白质序列分析所需的功能，使用这种单分子技术。
Using nanopores to sequence biopolymers was proposed more than a decade ago. Recent advances in enzyme-based control of DNA translocation and in DNA nucleotide resolution using modified biological pores have satisfied two technical requirements of a functional nanopore DNA sequencing device. Nanopore sequencing of proteins was also envisioned. Although proteins have been shown to move through nanopores, a technique to unfold proteins for processive translocation has yet to be demonstrated. Here we describe controlled unfolding and translocation of proteins through the α-hemolysin (α-HL) pore using the AAA+ unfoldase ClpX. Sequence-dependent features of individual engineered proteins were detected during translocation. These results demonstrate that molecular motors can reproducibly drive proteins through a model nanopore—a feature required for protein sequence analysis using this single-molecule technology.
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DOI：
10.1016/j.bbamcr.2011.06.007
发表时间：
2012-01
期刊：
Biochimica et biophysica acta
影响因子：
--
作者：
Baker TA;Sauer RT
通讯作者：
Sauer RT
影响因子：
10.5
作者：
Gottesman, S;Roche, E;Sauer, RT
通讯作者：
Sauer, RT
影响因子：
16
作者：
Kim, YI;Burton, RE;Baker, TA
通讯作者：
Baker, TA
影响因子：
11.4
作者：
Johnson, ES;Schwienhorst, I;Blobel, G
通讯作者：
Blobel, G
影响因子：
64.5
作者：
Aubin-Tam ME;Olivares AO;Sauer RT;Baker TA;Lang MJ
通讯作者：
Lang MJ