Structure of the S. aureus PI-specific phospholipase C reveals modulation of active site access by a titratable π-cation latched loop.
Structure of the S. aureus PI-specific phospholipase C reveals modulation of active site access by a titratable π-cation latched loop.
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DOI：
10.1021/bi300057q
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发表时间：
2012-03-27
期刊：
影响因子：
2.9
通讯作者：
Roberts MF
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Goldstein R;Cheng J;Stec B;Roberts MF
金黄色葡萄球菌分泌一种磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PIPLC)作为一种毒力因子，在酸性pH值下表现出比同类其他酶更高的活性，这是不寻常的。在pH=4.6和pH=7.5的条件下测定了该酶的晶体结构。在稍有碱性的条件下，金黄色葡萄球菌PI-PLC的结构与其他细菌PI-PLC的构象非常相似。然而，当在酸性条件下晶化时，活性中心附近αβ桶边缘的一大段移动环显示出~10ä的位移。这种酸性pH下环的置换是His258和Phe249之间可滴定的分子内π-阳离子相互作用的结果。突变蛋白H258Y在pH 4.6结晶的结构证实了这一点，该结构没有表现出大的环移。金黄色葡萄球菌PI-PLC的分子内π-阳离子相互作用解释了该酶在酸性pH条件下的活性，并提示了作为Phe249的竞争者，磷脂酰胆碱是如何动态激活该酶的。
Staphylococcus aureus secretes a phosphatidylinositol-specific phospholipase C (PIPLC) as a virulence factor that is unusual in exhibiting higher activity at acidic pH values than other enzymes in this class. We have determined the crystal structure of this enzyme at pH 4.6 and pH 7.5. Under slightly basic conditions, the S. aureus PI-PLC structure closely follows the conformation of other bacterial PI-PLCs. However, when crystallized under acidic conditions, a large section of mobile loop at the αβ-barrel rim in the vicinity of the active site shows ~10 Å shift. This loop displacement at acidic pH is the result of a titratable intramolecular π-cation interaction between His258 and Phe249. This was verified by a structure of the mutant protein H258Y crystallized at pH 4.6, which does not exhibit the large loop shift. The intramolecular π-cation interaction for S. aureus PI-PLC provides an explanation for the activity of the enzyme at acid pH and also suggests how phosphatidylcholine, as a competitor for Phe249, may kinetically activate this enzyme.
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DOI：
10.1107/s0907444904019158
发表时间：
2004-12-01
影响因子：
2.2
作者：
Emsley, P;Cowtan, K
通讯作者：
Cowtan, K
影响因子：
4.8
作者：
Feng, JW;Bradley, WD;Roberts, MF
通讯作者：
Roberts, MF
影响因子：
15
作者：
Hassan, A. Quamrul;Koh, John T.
通讯作者：
Koh, John T.
DOI：
10.1107/s0907444909052925
发表时间：
2010-02
期刊：
Acta crystallographica. Section D, Biological crystallography
影响因子：
--
作者：
Adams PD;Afonine PV;Bunkóczi G;Chen VB;Davis IW;Echols N;Headd JJ;Hung LW;Kapral GJ;Grosse-Kunstleve RW;McCoy AJ;Moriarty NW;Oeffner R;Read RJ;Richardson DC;Richardson JS;Terwilliger TC;Zwart PH
通讯作者：
Zwart PH
影响因子：
2.9
作者：
Guo, Su;Zhang, Xin;Roberts, Mary F.
通讯作者：
Roberts, Mary F.