Genetics tools for corpora allata specific gene expression in Aedes aegypti mosquitoes.
Genetics tools for corpora allata specific gene expression in Aedes aegypti mosquitoes.
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DOI：
10.1038/s41598-022-25009-4
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发表时间：
2022-11-28
影响因子：
4.6
通讯作者：
Noriega, Fernando G.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Nouzova, Marcela;Edwards, Marten J.;DeGennaro, Matthew;Leyva, Dennys;Tose, Lilian V.;Fernandez-Lima, Francisco;Noriega, Fernando G.
保幼激素（JH）是昆虫咽侧体（CA）合成的一种激素，控制昆虫的发育和生殖。因此，实现转基因在CA中的组织特异性表达将有利于蚊子的研究和控制。不同的CA启动子已被用于驱动果蝇中的转基因表达，但蚊子CA特异性启动子尚未被鉴定。使用CRISPR/Cas9系统，我们将编码报告绿色荧光蛋白（GFP）的转基因整合到保幼激素酸性甲基转移酶（JHAMT）的转录起始位点附近，JHAMT是编码JH生物合成酶的基因座，在埃及伊蚊的CA中特异性且高度表达。转基因个体在CA中表现出特异性GFP表达，但未能再现jhamt时空表达的完整模式。此外，我们创建了表达诱导型荧光标记物的GeneSwitch驱动和响应蚊子品系，使得能够通过诱导药物的存在或不存在来对转基因进行时间调节。GeneSwitch系统的使用以前没有在蚊子中报道过，并且提供了一种可以控制埃及伊蚊中转基因表达的新的诱导型二元系统。
Juvenile hormone (JH) is synthesized by the corpora allata (CA) and controls development and reproduction in insects. Therefore, achieving tissue-specific expression of transgenes in the CA would be beneficial for mosquito research and control. Different CA promoters have been used to drive transgene expression in Drosophila, but mosquito CA-specific promoters have not been identified. Using the CRISPR/Cas9 system, we integrated transgenes encoding the reporter green fluorescent protein (GFP) close to the transcription start site of juvenile hormone acid methyl transferase (JHAMT), a locus encoding a JH biosynthetic enzyme, specifically and highly expressed in the CA of Aedes aegypti mosquitoes. Transgenic individuals showed specific GFP expression in the CA but failed to reproduce the full pattern of jhamt spatiotemporal expression. In addition, we created GeneSwitch driver and responder mosquito lines expressing an inducible fluorescent marker, enabling the temporal regulation of the transgene via the presence or absence of an inducer drug. The use of the GeneSwitch system has not previously been reported in mosquitoes and provides a new inducible binary system that can control transgene expression in Aedes aegypti.
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影响因子：
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作者：
Moullan N;Mouchiroud L;Wang X;Ryu D;Williams EG;Mottis A;Jovaisaite V;Frochaux MV;Quiros PM;Deplancke B;Houtkooper RH;Auwerx J
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Noriega, Fernando G.