LASIC: Light Activated Site-Specific Conjugation of Native IgGs.
LASIC: Light Activated Site-Specific Conjugation of Native IgGs.
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DOI：
10.1021/acs.bioconjchem.5b00275
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发表时间：
2015-08-19
影响因子：
4.7
通讯作者：
Tsourkas A
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Hui JZ;Tamsen S;Song Y;Tsourkas A
从诊断测定到免疫治疗的许多生物学应用依赖于抗体缀合物的使用。这些缀合物的功效可显著地受免疫球蛋白G（IgG）被修饰的位点的影响。然而，提供对缀合位点的控制的现有方法存在许多不足，并且通常需要大量的时间和成本投资。我们已经开发了一种新的衔接蛋白，当被长波长紫外光激活时，可以共价和位点特异性地标记几乎任何天然全长IgG的Fc区，包括所有人IgG亚类。标记以前所未有的效率和速度发生（30分钟后>90%），对IgG亲和力没有影响。衔接子结构域可以被细菌表达并定制为包含多种部分（例如生物素、叠氮化物、荧光团），从而使抗体的可靠和有效缀合广泛地为研究人员所获得。
Numerous biological applications, from diagnostic assays to immunotherapies, rely on the use of antibody-conjugates. The efficacy of these conjugates can be significantly influenced by the site at which Immunoglobulin G (IgG) is modified. Current methods that provide control over the conjugation site, however, suffer from a number of shortfalls and often require large investments of time and cost. We have developed a novel adapter protein that, when activated by long wavelength UV light, can covalently and site-specifically label the Fc region of nearly any native, full-length IgG, including all human IgG subclasses. Labeling occurs with unprecedented efficiency and speed (>90% after 30 min), with no effect on IgG affinity. The adapter domain can be bacterially expressed and customized to contain a variety of moieties (e.g. biotin, azide, fluorophores), making reliable and efficient conjugation of antibodies widely accessible to researchers at large.
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