A homogeneous and nonisotopic assay for phosphatidylinositol 4-kinases.
A homogeneous and nonisotopic assay for phosphatidylinositol 4-kinases.
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DOI：
10.1016/j.ab.2011.05.046
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发表时间：
2011-10-01
影响因子：
2.9
通讯作者：
Balla T
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Tai AW;Bojjireddy N;Balla T
磷脂酰肌醇4-激酶催化磷脂酰肌醇转化为磷脂酰肌醇4-磷酸(PtdIns4P)。PI4KA、PI4KB、PI4K2A和PI4K2B这四种已知的哺乳动物PI4-激酶在细胞内的脂质和蛋白质运输中发挥作用。PI4KA和PI4KB还有助于几种正义RNA病毒的复制。适用于高通量筛选的分析方法将有助于鉴定这些激酶的选择性抑制物。我们描述了一种基于对由激酶反应产生的ADP的生物发光检测的均一和非同位素的PI4-激酶活性测定方法。我们用已知的PI4-激酶的非选择性抑制剂评估了这一方法，并表明它的表现类似于先前文献中描述的放射测定形式。此外，在384孔格式下，该方法为PI4KA生成了>；0.7的Z因子值，证明了其适用于高通量筛选应用。
Phosphatidylinositol 4-kinases (PI 4-kinases) catalyze the conversion of phosphatidylinositol to phosphatidylinositol 4-phosphate (PtdIns4P). The four known mammalian PI 4-kinases, PI4KA, PI4KB, PI4K2A, and PI4K2B have roles in intracellular lipid and protein trafficking. PI4KA and PI4KB also assist the replication of several positive-sense RNA viruses. The identification of selective inhibitors of these kinases would be facilitated by assays suitable for high-throughput screening. We describe a homogenous and nonisotopic assay for PI 4-kinase activity based on the bioluminescent detection of the ADP produced by kinase reactions. We have evaluated this assay with known nonselective inhibitors of PI 4-kinases and show that it performs similarly to radiometric assay formats previously described in the literature. In addition, this assay generates Z-factor values of > 0.7 for PI4KA in 384-well format, demonstrating its suitability for high-throughput screening applications.
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影响因子：
64.5
作者：
Knight, Zachary A.;Gonzalez, Beatriz;Shokat, Kevan M.
通讯作者：
Shokat, Kevan M.
DOI：
10.1073/pnas.92.12.5317
发表时间：
1995-06-06
影响因子：
11.1
作者：
NAKANISHI, S;CATT, KJ;BALLA, T
通讯作者：
BALLA, T
影响因子：
4.8
作者：
Nakagawa, T;Goto, K;Kondo, H
通讯作者：
Kondo, H
DOI：
10.1073/pnas.0902693106
发表时间：
2009-05-05
影响因子：
11.1
作者：
Berger, Kristi L.;Cooper, Jacob D.;Randall, Glenn
通讯作者：
Randall, Glenn
DOI：
10.1016/0006-291x(89)91641-0
发表时间：
1989-04-14
影响因子：
3.1
作者：
LI, YS;PORTER, FD;DEUEL, TF
通讯作者：
DEUEL, TF