Identification of enzymes involved in SUMOylation in Trypanosoma brucei.
Identification of enzymes involved in SUMOylation in Trypanosoma brucei.
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布氏锥虫 SUMO 化相关酶的鉴定
DOI：
10.1038/srep10097
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发表时间：
2015-05-11
影响因子：
4.6
通讯作者：
Tu X
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Ye K;Zhang X;Ni J;Liao S;Tu X
小泛素样修饰剂 (SUMO) 是一种可逆的翻译后蛋白修饰剂，在多种细胞机制中发挥着重要作用。 SUMO 修饰涉及三种酶：E1（激活酶）、E2（结合酶）和 E3（连接酶）。高等真核生物中的 SUMO 化系统和过程已得到充分研究。然而，对于原生动物，例如布氏锥虫（T. brucei），这些仍然知之甚少。在此，我们通过序列分析和 GST Pull-down 测定鉴定了 T. brucei 中 SUMO 化途径的 E1 (TbAos1/TbUba2) 和 E2 (TbUbc9) 酶。此外，我们用重组酶成功地在体外重建了 SUMOylation 系统。使用该系统，TbUba2 和 TbUbc9 的活性位点分别位于 Cys343 和 Cys132，并且中心蛋白同源物 (TbCentrin3) 被确定为 T. brucei 中 SUMO 化的靶标。总而言之，我们的结果表明 TbAos1/TbUba2 和 TbUbc9 是 T. brucei 中 SUMO 化系统的真正 E1 和 E2 酶。
Small ubiquitin-like modifier (SUMO), a reversible post-translational protein modifier, plays important roles in diverse cellular mechanisms. Three enzymes, E1 (activating enzyme), E2 (conjugating enzyme) and E3 (ligase), are involved in SUMO modification. SUMOylation system and process in higher eukaryotes have been well studied. However, in protozoa, such as Trypanosoma brucei (T. brucei), these remain poorly understood. Herein, we identified the E1 (TbAos1/TbUba2) and E2 (TbUbc9) enzymes of SUMOylation pathway in T. brucei by sequence analysis and GST pull-down assay. Furthermore, we successfully reconstructed the SUMOylation system in vitro with recombinant enzymes. Using this system, the active site of TbUba2 and TbUbc9 was revealed to be located at Cys343 and Cys132, respectively and a centrin homologue (TbCentrin3) was identified to be a target of SUMOylation in T. brucei. Altogether, our results demonstrate that TbAos1/TbUba2 and TbUbc9 are the bona fide E1 and E2 enzymes of the SUMOylation system in T. brucei.
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小泛素样修饰剂 (SUMO) 对于布氏锥虫的细胞周期调节至关重要
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作者：
Liao, Shanhui;Wang, Tao;Tu, Xiaoming
通讯作者：
Tu, Xiaoming
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作者：
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Blobel, G
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11.4
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Lois, LM;Lima, CD
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Lima, CD