DNA polymerase β-mediated long patch base excision repair -: Poly(ADP-ribose) polymerase-1 stimulates strand displacement DNA synthesis
DNA polymerase β-mediated long patch base excision repair -: Poly(ADP-ribose) polymerase-1 stimulates strand displacement DNA synthesis
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DOI：
10.1074/jbc.c100292200
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发表时间：
2001-08-31
影响因子：
4.8
通讯作者：
Wilson, SH
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Prasad, R;Lavrik, OI;Wilson, SH
最近，小鼠细胞提取物的光亲和标记实验表明，PARP-1 可以作为停滞的 DER 中间体的监视蛋白。为了进一步了解 PARP-1 在 DER 中的作用，我们使用包含 34 碱基对 DER 底物和五种纯化的人类酶的重构系统检查了长补丁 DER 中的 DNA 合成和瓣切除步骤：尿嘧啶 DNA 糖基化酶、脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶、DNA 聚合酶 beta、瓣核酸内切酶-1 (FEN-1) 和 PARP-1。 PARP-1 刺激该系统中 DNA 聚合酶 13 的链置换 DNA 合成；这种刺激取决于 FEN-1 的存在。因此，PARP-1 和 FEN-1 合作激活长补丁 DER。结果在 DER 子通路选择模型的背景下进行了讨论，说明了 PARP-1 作为停滞 DER 中间体的监视蛋白和长补丁 DER DNA 合成的激活因子的双重作用。
Recently, photoaffinity labeling experiments with mouse cell extracts suggested that PARP-1 functions as a surveillance protein for a stalled DER intermediate. To further understand the role of PARP-1 in DER, we examined the DNA synthesis and flap excision steps in long patch DER using a reconstituted system containing a 34-base pair DER substrate and five purified human enzymes: uracil-DNA glycosylase, apurinic/apyrimidinic endonuclease, DNA polymerase beta, flap endonuclease-1 (FEN-1), and PARP-1. PARP-1 stimulates strand displacement DNA synthesis by DNA polymerase 13 in this system; this stimulation is dependent on the presence of FEN-1. PARP-1 and FEN-1, therefore, cooperate to activate long patch DER. The results are discussed in the context of a model for DER sub-pathway choice, illustrating a dual role for PARP-1 as a surveillance protein for a stalled DER intermediate and an activating factor for long patch DER DNA synthesis.