Effects of 1,25 and 24,25 Vitamin D on Corneal Fibroblast VDR and Vitamin D Metabolizing and Catabolizing Enzymes.
Effects of 1,25 and 24,25 Vitamin D on Corneal Fibroblast VDR and Vitamin D Metabolizing and Catabolizing Enzymes.
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1，25和24，25维生素D对角膜成纤维细胞VDR及维生素D代谢和分解酶的影响
DOI：
10.1080/02713683.2021.1884726
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发表时间：
2021-09
影响因子：
2
通讯作者：
Watsky MA
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Lu X;Chen Z;Watsky MA
目的 研究 1,25-Vit D3 和 24,25-Vit D3 对角膜成纤维细胞维生素 D 相关酶 CYP27B1 和 CYP24A1 表达的影响，以及维生素 D 受体 (VDR) 和蛋白质二硫键异构酶 A 家族成员 3 (Pdia3) 在这些细胞中的作用。采用免疫组织化学法检测角膜中 CYP24A1、CYP27B1、VDR 和 Pdia3 的表达。使用蛋白质印迹法测量人和小鼠成纤维细胞（包括用 1,25-Vit D3 (20 nM) 和 24,25-Vit D3 (100 nM) 处理的 VDR KO 小鼠细胞中的蛋白质表达）。 Pdia3 抑制剂 LOC14 用于探索 Pdia3 作为 Vit D3 受体在这些细胞中的作用。 CYP24A1、CYP27B1、VDR 和 Pdia3 均在小鼠和人角膜成纤维细胞中表达。 1,25-Vit D3 显着增加人和小鼠成纤维细胞中的 VDR 表达。 1,25-Vit D3 和 24,25-VitD3 显着增加人、VDR WT 小鼠和 VDR KO 小鼠角膜成纤维细胞中 CYP24A1 和 CYP27B1 的表达水平。在用 1,25-Vit D3 或 24,25-Vit D3 加 LOC14 处理的 VDR KO 小鼠成纤维细胞中，CYP24A1 和 CYP27B1 表达没有变化。人成纤维细胞 VDR、CYP24A1 和 CYP27B1 表达不受 LOC14 影响。维生素 D 代谢酶、VDR 和 Pdia3 均在小鼠和人角膜成纤维细胞中表达。 1,25-Vit D3 通过 VDR 和 Pdia3 途径以物种依赖性方式调节成纤维细胞维生素 D 酶。在没有 VDR 的情况下，24,25-Vit D3 可以增加成纤维细胞 CYP24A1 和 CYP27B1 的表达，并且可能参与独立于 1,25-Vit D3 或 VDR 的成纤维细胞调节。
To investigate the effects of 1,25-Vit D3 and 24,25-Vit D3 on corneal fibroblast expression of the vitamin D-associated enzymes CYP27B1 and CYP24A1 and the roles of the vitamin D receptor (VDR) and protein disulfide isomerase, family A, member 3 (Pdia3) in these cells. CYP24A1, CYP27B1, VDR, and Pdia3 expression in corneas was detected using immunohistochemistry. Western blotting was used to measure protein expression in human and mouse fibroblasts, including VDR KO mouse cells, treated with 1,25-Vit D3 (20 nM) and 24,25-Vit D3 (100 nM). The Pdia3 inhibitor LOC14 was used to explore the role of Pdia3 as a Vit D3 receptor in these cells. CYP24A1, CYP27B1, VDR, and Pdia3 were all expressed in mouse and human corneal fibroblasts. 1,25-Vit D3 significantly increased VDR expression in human and mouse fibroblasts. 1,25-Vit D3 and 24,25-VitD3 significantly increased CYP24A1 and CYP27B1 expression level in human, VDR WT mouse, and VDR KO mouse corneal fibroblasts. CYP24A1 and CYP27B1 expression was unchanged in VDR KO mouse fibroblasts treated with 1,25-Vit D3 or 24,25-Vit D3 plus LOC14. Human fibroblast VDR, CYP24A1, and CYP27B1 expression were unaffected by LOC14. Vitamin D metabolic enzymes, VDR, and Pdia3 are all expressed in mouse and human corneal fibroblasts. 1,25-Vit D3 modulates fibroblast vitamin D enzymes through both the VDR and Pdia3 pathways in a species-dependent manner. 24,25-Vit D3 can increase expression of fibroblast CYP24A1 and CYP27B1 in the absence of VDR and is likely involved in fibroblast regulation independent of 1,25-Vit D3 or VDR.
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