Cloning of Variable Domains from Mouse Hybridoma by PCR
Cloning of Variable Domains from Mouse Hybridoma by PCR
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通过 PCR 从小鼠杂交瘤中克隆可变结构域
DOI：
10.1007/978-3-642-01144-3_1
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发表时间：
2010
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Dübel
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Strebe;Breitling;Moosmayer;Brocks;Dübel
一些杂交瘤细胞系是非常低的生产者，难以培养，或者抗体生产在长时间培养后丧失。在这些情况下，重组“杂交瘤永生化”可以拯救有价值的抗体用于在大肠杆菌中进一步无限增殖。其他重组生产系统。此外，具有有希望的特异性但低亲和力的单克隆抗体可以通过噬菌体展示来改进，或者小鼠抗体可以人源化用于治疗。本章描述了用于从小鼠和大鼠杂交瘤细胞系中分离和克隆抗体Fv片段（抗原结合区）DNA的PCR程序的经过充分验证的寡核苷酸引物组。该方案包括鉴定E的菌落染色测定。产生scFv抗体片段的大肠杆菌克隆。
Some hybridoma cell lines are very low producers, difficult to cultivate, or antibody production is lost upon prolonged culture. In these cases, a recombinant "hybridoma immortalization" can rescue a valuable antibody for further unlimited propagation inE. colior other recombinant production systems. Further, monoclonal antibodies with promising specificity, but low affinity, can be improved by phage display, or mouse antibodies can be humanised for therapy. This chapter describes sets of thoroughly validated oligonucleotide primers for a PCR procedure to isolate and clone the DNA of antibody Fv fragments (antigen binding region) from mouse and rat hybridoma cell lines. The protocol includes a colony staining assay to identifyE. coliclones producing scFv antibody fragments.
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DOI：
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发表时间：
1995
期刊：
Therapeutic immunology
影响因子：
--
作者：
D. Moosmayer;S. Dübel;B. Brocks;H. Watzka;C. Hampp;P. Scheurich;M. Little;K. Pfizenmaier
通讯作者：
K. Pfizenmaier
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影响因子：
2.2
作者：
Strebe N;Guse A;Schüngel M;Schirrmann T;Hafner M;Jostock T;Hust M;Müller W;Dübel S
通讯作者：
Dübel S
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影响因子：
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作者：
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通讯作者：
S. Dübel