牛病毒性腹泻病毒NS3蛋白原核表达纯化及多克隆抗体的制备
牛病毒性腹泻病毒NS3蛋白原核表达纯化及多克隆抗体的制备
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DOI：
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发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
盛金良
中科院分区：
文献类型：
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作者：
周子恒;张 哲;肖盛中;蔡卓轩;李 岩;张彦红;杨 艳;陈创夫;盛金良
原 核 表 达 牛 病 毒 性 腹 泻 病 毒 （ＢＶＤＶ）ＮＳ３ 蛋 白，并以此免疫动物制备 多克隆抗体。对.ＢＶＤＶ ＮＳ３蛋白的抗原决定簇氨基酸序列分析，构建重组质粒ｐＥＴ３０ａ－ＮＳ３，转化至 Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）感.受态细胞中，使用ＩＰＴＧ 诱导目的蛋白表达。选择最优诱导条件对目的蛋白进行亲和纯化，目的蛋白主要以.包涵体形式表达，从而获得 ＮＳ３蛋白。使用 ＮＳ３蛋白免疫新西兰大白兔，制备兔抗 ＮＳ３蛋白多克隆抗体，.采用 ＥＬＩＳＡ 方法检测多克隆抗体效价。结果显示，成功表达并纯化出 ＢＶＤＶ ＮＳ３蛋白，制备的兔抗 ＮＳ３.蛋白多克隆抗体效价大于１∶１２８０００，为建立 ＢＶＤＶ 抗体／抗原检测方法及疫苗的研究奠定了基础。