Multiplex IP-FCM (immunoprecipitation-flow cytometry): Principles and guidelines for assessing physiologic protein-protein interactions in multiprotein complexes.
Multiplex IP-FCM (immunoprecipitation-flow cytometry): Principles and guidelines for assessing physiologic protein-protein interactions in multiprotein complexes.
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DOI：
10.1016/j.ymeth.2011.09.005
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发表时间：
2012-02
期刊：
影响因子：
4.8
通讯作者：
Schrum, Adam G.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Bida, Anya T.;Gil, Diana;Schrum, Adam G.
有显着的兴趣，在开发的方法，有可能增加获得'的相互作用组'的实验和临床应用。流式细胞术检测免疫沉淀（IP-FCM）是一种稳健的生化方法，可用于以高灵敏度测量多蛋白复合物（MPC）中的生理蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）。因为它是基于抗体介导的捕获蛋白质复合物到微球上，IP-FCM是潜在的兼容的多重平台，可以允许同时评估许多生理PPI。在这里，我们考虑了环境分析物条件（AAC）和珠间独立性的原理，并提供了一组实验模板，显示如何将单重IP-FCM转换为多重IP-FCM，包括确认数据采集实验条件有效性的测定。我们的结论是，单重IP-FCM可以成功地升级到多路复用格式，并提出多路复用IP-FCM的独特优势，使其成为一种方法，这是可能促进新的PPI数据从主要细胞来源的收购。
There is significant interest in the development of methods with the potential to increase access to ‘the interactome’ for both experimental and clinical applications. Immunoprecipitation detected by flow cytometry (IP-FCM) is a robust, biochemical method that can be used for measuring physiologic protein-protein interactions (PPI) in multiprotein complexes (MPC) with high sensitivity. Because it is based on antibody-mediated capture of protein complexes onto microspheres, IP-FCM is potentially compatible with a multiplex platform that could allow simultaneous assessment of many physiologic PPI. Here, we consider the principles of ambient analyte conditions (AAC) and inter-bead independence, and provide a template set of experiments showing how to convert singleplex IP-FCM to multiplex IP-FCM, including assays to confirm the validity of the experimental conditions for data acquisition. We conclude that singleplex IP-FCM can be successfully upgraded to multiplex format, and propose that the unique strengths of multiplex IP-FCM make it a method that is likely to facilitate the acquisition of new PPI data from primary cell sources.
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旧CD8+ T细胞上的B7-H1表达对老年动物的免疫反应的激活负调节。
DOI：
10.4049/jimmunol.0903561
发表时间：
2010-05-15
期刊：
Journal of immunology (Baltimore, Md. : 1950)
影响因子：
--
作者：
Mirza N;Duque MA;Dominguez AL;Schrum AG;Dong H;Lustgarten J
通讯作者：
Lustgarten J
DOI：
10.1016/0731-7085(89)80079-2
发表时间：
1989-01-01
影响因子：
3.4
作者：
EKINS, RP
通讯作者：
EKINS, RP
影响因子：
7
作者：
Han, Chia-Li;Chien, Chih-Wei;Chen, Yu-Ju
通讯作者：
Chen, Yu-Ju
影响因子：
7
作者：
Poetz, Oliver;Henzler, Tanja;Joos, Thomas O.
通讯作者：
Joos, Thomas O.
影响因子：
64.8
作者：
Rual, JF;Venkatesan, K;Vidal, M
通讯作者：
Vidal, M