Weak protein-cationic co-ion interactions addressed by X-ray crystallography and mass spectrometry.
Weak protein-cationic co-ion interactions addressed by X-ray crystallography and mass spectrometry.
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通过 X 射线晶体学和质谱分析解决弱蛋白质-阳离子共离子相互作用。
DOI：
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发表时间：
2014
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
M. Riès‐Kautt
中科院分区：
文献类型：
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作者：
P. Bénas;N. Auzeil;L. Legrand;F. Brachet;A. Regazzetti;M. Riès‐Kautt
本文通过解析13种带正电荷的鸡蛋清溶菌酶（HEWL）的X射线结构和电喷雾质谱（ESI-MS）研究了Rb（+）、Cs（+）、Mn（2+）、Co（2+）和Yb（3+）在HEWL上的吸附。在293 K时，结合阳离子的数量顺序为Cs（+）< Mn（2+）> Co（2+）< Yb（3+）。 在100 K下，HEWL结合Rb（+）（qtot = 0.7）比Cs（+）（qtot = 3.9）少。 晶体闪冷大大增加了Cs（+）的结合，但对Yb（3+）的影响很小，表明不同的相互作用。甘油的加入增加了Yb（3+）阳离子的数量，但仅略微增加Rb（+）阳离子的数量。用相同的氯化物进行HEWL滴定，然后进行ESI-MS分析，结果表明，只有约10%的HEWL结合Cs（+），约40%结合1-2个Yb（3+）阳离子，而蛋白质结合1-3个Mn（2+）或Co（2+）阳离子的最高结合达到60-70%。X射线晶体学分析表明，单价Rb（+）和Cs（+）优先与羰基结合，而多价Mn（2+）、Co（2+）和Yb（3+）与羧基结合。这项工作阐明了霍夫迈斯特阳离子系列对蛋白质溶解度的影响的基础。
The adsorption of Rb(+), Cs(+), Mn(2+), Co(2+) and Yb(3+) onto the positively charged hen egg-white lysozyme (HEWL) has been investigated by solving 13 X-ray structures of HEWL crystallized with their chlorides and by applying electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS) first to dissolved protein crystals and then to the protein in buffered salt solutions. The number of bound cations follows the order Cs(+) < Mn(2+) ≃ Co(2+) < Yb(3+) at 293 K. HEWL binds less Rb(+) (qtot = 0.7) than Cs(+) (qtot = 3.9) at 100 K. Crystal flash-cooling drastically increases the binding of Cs(+), but poorly affects that of Yb(3+), suggesting different interactions. The addition of glycerol increases the number of bound Yb(3+) cations, but only slightly increases that of Rb(+). HEWL titrations with the same chlorides, followed by ESI-MS analysis, show that only about 10% of HEWL binds Cs(+) and about 40% binds 1-2 Yb(3+) cations, while the highest binding reaches 60-70% for protein binding 1-3 Mn(2+) or Co(2+) cations. The binding sites identified by X-ray crystallography show that the monovalent Rb(+) and Cs(+) preferentially bind to carbonyl groups, whereas the multivalent Mn(2+), Co(2+) and Yb(3+) interact with carboxylic groups. This work elucidates the basis of the effect of the Hofmeister cation series on protein solubility.
影响因子：
2.9
作者：
ARAKAWA, T;TIMASHEFF, SN
通讯作者：
TIMASHEFF, SN