pEGFP-N1-omp25荧光真核表达载体的构建及鉴定
pEGFP-N1-omp25荧光真核表达载体的构建及鉴定
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DOI：
10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2015.05.007
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发表时间：
2015
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
王振海
中科院分区：
文献类型：
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作者：
刘爱翠;王妍柏;汪超;王振海
目的克隆布鲁氏杆菌外膜蛋白omp25基因并构建荧光真核表达载体p EGFP-N1-omp25,检测其在大鼠脑内的表达。方法根据Genebank中omp25基因的核苷酸序列,设计并合成1对引物,以布鲁氏杆菌总基因组DNA为模板,进行PCR扩增得到omp25基因片段,并将omp25基因片段及质粒p EGFP-N1分别进行进行酶切、体外连接,使其定向重组,构建其重组质粒。将制备的重组质粒经侧脑室注射至大鼠,检测p EGFP-N1-omp25在大鼠脑内的表达。结果 PCR扩增出642bp大小的片段,挑取的LB固体