体外激活骨细胞Notch信号对骨髓基质细胞成骨分化的影响

体外激活骨细胞Notch信号对骨髓基质细胞成骨分化的影响
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DOI:
10.16016/j.1000-5404.202001048
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发表时间:
2020
期刊:
第三军医大学学报
影响因子:
--
通讯作者:
涂小林
涂小林
中科院分区:
其他
文献类型:
--
作者:
谢映春;涂小林

文献摘要

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目的探究体外激活骨细胞Notch信号对骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)成骨分化的影响。方法设置Cre重组腺病毒(Ad-Cre)及对照腺病毒GFP(Ad-GFP),分别转染Rosa~(Notch)小鼠骨细胞后与野生C57BL/6小鼠BMSCs共培养为Ad-Cre组及Ad-GFP组,设置仅BMSCs为Blank组。碱性磷酸酶染色及生化定量测定碱性磷酸酶(ALP);qPCR检测转染后骨细胞Notch信号靶基因及共培养产物成骨相关标志物、Notch信号配体及成血管相关标志物,茜素红染色检测成骨诱导21 d钙盐沉积水平。结果Ad-Cre成功激活Rosa~(Notch)小鼠骨细胞Notch信号,ALP染色及生化定量结果显示Ad-Cre组ALP表达相较Ad-GFP组及Blank组显著降低(P <0.05),Ad-GFP组与Blank组间无统计学差异;qPCR结果显示Ad-Cre组共培养产物成骨标志物ALP、核心结合因子a1(Runx2)、特异性骨转化因子(Ostrix)及Notch配体Dll4 mRNA转录水平相较Ad-GFP组及Blank组显著降低(P <0.05),Jag1 mRNA转录水平显著降低(P <0.05);血管内皮生长因子(VEGF)、低氧诱导因子(hypoxiainducible factor 1α,HIF1α)、血小板内皮细胞黏附分子(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,CD31/PECAM-1)及内皮粘蛋白(endomucin,EMCN) mRNA转录水平相较Ad-GFP组及Blank组显著增高(P <0.05);茜素红染色结果显示Ad-Cre组在成骨诱导培养基作用21 d后钙盐沉积水平相较Ad-GFP组及Blank组显著降低。结论体外激活骨细胞Notch信号抑制骨髓基质细胞成骨分化。