Whole Mount In Situ Hybridization and Immunohistochemistry for Zebrafish Larvae
Whole Mount In Situ Hybridization and Immunohistochemistry for Zebrafish Larvae
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DOI：
10.1007/978-1-4939-7649-2_25
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发表时间：
2018-01-01
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
Monk, Kelly R.
中科院分区：
文献类型：
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作者：
Cunningham, Rebecca L.;Monk, Kelly R.
原位杂交使得能够可视化mRNA定位，并且免疫组织化学使得能够可视化组织或生物体内的蛋白质定位。这两种技术都已广泛用于斑马鱼（Thisse等人，Development 119：1203-1215，1993;达顿等人，Development 128：4113-4125，2001; Gilmour等人，Neuron 34：577-588，2002;里昂等人，Curr Biol 15：513-524，2005），包括用于显示施万细胞中的mRNA定位（里昂（Lyons）等人，Curr Biol 15：513-524，2005; Monk等人，Science 325：1402-1405，2009）。对于原位杂交，在这里，我们概述了如何产生RNA探针，进行整体安装在原位杂交的幼虫，并列出RNA探针，标记不同阶段的雪旺细胞在斑马鱼的发展。对于免疫组织化学，我们概述的协议可用于标记感觉和运动神经的许旺细胞，以检查发育阶段，形态，增殖和凋亡等特性。
In situ hybridization enables visualization of mRNA localization, and immunohistochemistry enables visualization of protein localization within a tissue or organism. Both techniques have been extensively utilized in zebrafish (Thisse et al., Development 119:1203-1215, 1993; Dutton et al., Development 128: 4113-4125, 2001; Gilmour et al., Neuron 34:577-588, 2002; Lyons et al., Curr Biol 15:513-524, 2005) including for visualization of mRNA localization in Schwann cells (Lyons et al., Curr Biol 15:513-524, 2005; Monk et al., Science 325:1402-1405, 2009). For in situ hybridization, here, we outline how to generate RNA probes, conduct whole mount in situ hybridization for larvae, and list RNA probes that label different stages of Schwann cell development in zebrafish. For immunohistochemistry, the protocol we outline can be used to mark Schwann cells of sensory and motor nerves to examine properties such as developmental stage, morphology, proliferation, and apoptosis.